Определение трамадола и его основных метаболитов в плазме крови лошадей методами высокоэффективной жидкостной хроматографии с флуориметрическим детектированием и тандемной масс-спектрометрии с жидкостной хроматографией и ионизацией электроспреем

Трамадол — анальгетик центрального действия, который применяют в клинической практике для лечения боли у людей на протяжении последних двух десятилетий. Клинический эффект трамадола напрямую связан с его метаболизмом, поскольку его метаболиты обладают различной анальгетической активностью. O-Десметилтрамадол (M1), его основной активный метаболит, в 200 раз более эффективен в отношении μ-рецептора, чем исходный препарат. В последние годы трамадол получил широкое распространение в ветеринарной медицине, однако его применение у некоторых видов животных вызывает сомнения. Целью настоящего исследования была разработка нового чувствительного метода выявления полного метаболического профиля препарата у лошадей с помощью анализа плазмы крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (HPLC) с флуориметрическим (FL) и масс-спектрометрическим детектированием с фотодиодной матрицей и ионизацией электроспреем (PDA-ESI-MS) после перорального введения препарата пролонгированного действия в дозе 5 мг/кг. При проведении HPLC/FL-сравнения хроматографического профиля плазмы крови лошадей с профилем стандартной смеси основные пики предположительно были идентифицированы как трамадол и его метаболиты O-десметилтрамадол (M1) и N,O-десметилтрамадол (M5). Анализ методом LC/PDA-ESI-MS/MS подтвердил результаты, полученные методом HPLC/FL, а также позволил идентифицировать ещё два метаболита: N-десметилтрамадол (M2) и N,N-дидесметилтрамадол (M3). Кроме того, был обнаружен и идентифицирован ещё один метаболит — M6. Полученные результаты демонстрируют целесообразность и преимущества методов LC/ESI-MS/MS при поиске метаболитов трамадола в образцах плазмы крови лошадей.