Характеристика протостановых тритерпеноидов Alisma orientalis методом сверхэффективной жидкостной хроматографии с квадруполь-времяпролётной масс-спектрометрией

Разработан и оптимизирован надёжный и чувствительный метод сверхэффективной жидкостной хроматографии, совмещённой с квадруполь-времяпролётной масс-спектрометрией (UPLC/Q-TOF-MS), для анализа протостановых тритерпеноидов в широко применяемом средстве традиционной китайской медицины Alisma orientalis (Sam.) Juzep. Экстракт A. orientalis разделяли на колонке Waters ACQUITY HSS T3 (100 × 2,1 мм, 1,8 мкм) с использованием 0,1% (об./об.) муравьиной кислоты и ацетонитрила. За 7 минут удалось разделить 20 протостановых тритерпеноидов, включая 19 известных соединений и одно новое. Впервые описаны закономерности фрагментации протостановых тритерпеноидов при тандемной масс-спектрометрии с диссоциацией, индуцированной столкновениями (CID). Перегруппировка водорода при гидроксильной группе в положении C-23 приводит в ходе CID к разрыву связи между C-23 и C-24 в скелете протостановых тритерпеноидов. Этот разрыв представляет собой характерный путь фрагментации при CID для данного класса тритерпеноидов и позволяет дополнительно различать некоторые позиционные изомеры, содержащие ацетильную группу при C-23 или C-24. Выделенные соединения идентифицировали, сопоставляя их времена удерживания и характер фрагментации при CID с соответствующими показателями стандартных образцов; в ряде случаев соединения предварительно идентифицировали по соответствию эмпирических молекулярных формул данным литературы. Разработанный метод UPLC/Q-TOF-MS позволяет эффективно устанавливать структуру протостановых тритерпеноидов, выделенных из A. orientalis.