Масс-спектрометрическая идентификация и характеристика новых метаболитов флуоксиместерона в моче человека методом жидкостной хроматографии с тандемной времяпролётной масс-спектрометрией

В исследовании метаболиты флуоксиместерона в моче изучали методом жидкостной хроматографии с квадрупольным времяпролётным тандемным масс-спектрометрическим анализом (LC-QTOFMS) с измерением точной массы. В двух контрольных образцах мочи, положительных на флуоксиместерон, обнаружили 12 метаболитов, включая исходный препарат. Для оценки точности определения химических формул в эксперименте полносканового анализа в положительных ионах использовали три параметра: погрешность между фактической и расчётной массой протонированных и изотопных молекул, а также соответствие содержания протонированных и изотопных молекул. Для 13 аналитов точность определения массы составила менее 1,1 ppm, а соответствие изотопного распределения — более 94 баллов. На основании данных об ионизации, фрагментации CID, точной массе продукт-ионов, а также сопоставления точной массы и времени удерживания с соответствующими стандартами были обнаружены флуоксиместерон и 12 его метаболитов, включая три ранее не описанных. Химические структуры трёх новых метаболитов идентифицированы как 9-фтор-17β-ол-17-метил-11-ен-5α-андростан-3-он (F13), 9-фтор-17β-ол-17-метил-11-ен-5β-андростан-3-он (F8) и 9-фтор-17β-ол-17-метил-5-андростан-3,6,11-трион. Кроме того, в моче человека обнаружен дигидроксилированный метаболит (F12) — 6,16-дигидроксилированный флуоксиместерон, который ранее считался выявляемым только в моче лошадей.