Обзорная глава: количественная ПЦР

Количественная ПЦР (qPCR), также называемая ПЦР в реальном времени или количественной ПЦР в реальном времени, — это метод на основе ПЦР, который позволяет одновременно амплифицировать целевую последовательность ДНК и определять концентрацию этой ДНК в реакционной смеси. Метод даёт возможность рассчитать исходную концентрацию матрицы и поэтому широко применяется для оценки числа копий ДНК, вирусной нагрузки, выявления однонуклеотидных полиморфизмов и аллельной дискриминации. Если перед количественной ПЦР проводят ПЦР с обратной транскрипцией, этот метод позволяет измерять экспрессию мРНК и считается золотым стандартом подтверждения данных микрочипового анализа экспрессии генов. Учитывая широкое применение количественной ПЦР и множество разработанных технических вариантов, краткий обзор метода, включающий технические основы, доступные химические подходы и способы анализа данных, послужит основой для планирования экспериментов и оценки результатов.