Новый потенциальный биомаркер злоупотребления метастероном в моче человека, выявляемый методом жидкостной хроматографии с квадрупольно-времяпролётной масс-спектрометрией

В этом исследовании метаболические профили метастерона в моче изучали методом жидкостной хроматографии с квадрупольно-времяпролётной масс-спектрометрией (LC-QTOF-MS) в режимах полного сканирования и целевого MS/MS-анализа с измерением точной массы. Здоровый мужчина добровольно принял препарат; образцы мочи обрабатывали методом жидкость–жидкостьной экстракции. При полном сканировании искали хроматографические пики потенциальных метаболитов, используя теоретический [M − H]⁻ в качестве целевого иона, а в целевом MS/MS-анализе изучали фактически образующиеся депротонированные ионы. У метастерона выявили 15 метаболитов, включая два новых сульфатных конъюгата (S1 и S2), три глюкуронидных конъюгата (G2, G6 и G7) и три свободных метаболита (M2, M4 и M6). Три метаболита (G4, G5 и M5) впервые обнаружены в образцах мочи человека. Поскольку у метаболитов метастерона II фазы отсутствовали информативные фрагменты, позволяющие установить структуру стероидного кольца, для получения структурной информации применяли газовую хроматографию с масс-спектрометрией (GC-MS). Исследовали триметилсилилированный метаболит I фазы, высвобожденный после ферментативного гидролиза, а предполагаемую структуру устанавливали с помощью комплексного масс-спектрометрического подхода. Также анализировали сроки выявления метаболитов. Метаболит G2 (18-nor-17β-hydroxymethyl-2α, 17α-dimethyl-androst-13-en-3α-ol-ξ-O-glucuronide) оказался новым потенциальным биомаркером злоупотребления метастероном: его можно выявлять в течение 10 дней.