Быстрое определение антиэстрогенных препаратов в моче методом газовой хроматографии/масс-спектрометрии: валидация метода и применение к реальным образцам

Разработан быстрый скрининговый протокол для одновременного определения девяти антиэстрогенных препаратов (аминоглутетимид, анастрозол, кломифен, дростанолон, форместан, летрозол, местеролон, тамоксифен, тестолактон) и пяти их метаболитов в моче человека. После ферментативного гидролиза эти соединения можно одновременно извлекать из мочи простым методом жидкостно-жидкостной экстракции в щелочной среде. Затем аналиты анализировали методом быстрой газовой хроматографии/масс-спектрометрии (ГХ/МС) после дериватизации. Использование короткой колонки, высокой скорости потока газа-носителя и быстрого повышения температуры обеспечило эффективное разделение всех аналитов примерно за 4 мин, что позволило проводить анализ 10 образцов в час. Разработанный аналитический метод валидировали в соответствии с рекомендациями UNI EN ISO/IEC 17025 для качественных методов. Оценивали предел обнаружения, селективность, линейность, повторяемость, робастность и эффективность экстракции. Высокая частота регистрации масс-спектров при использовании настольного квадрупольного масс-анализатора обеспечила точное определение формы пиков как в режиме полного сканирования, так и в режиме мониторинга выбранных ионов, а в последнем режиме — высокую чувствительность. Таким образом, характеристики метода сопоставимы с показателями традиционного анализа методом ГХ/МС. Метод успешно испытан на реальных образцах, полученных при лечении госпитализированных пациентов, и может эффективно применяться в клинических исследованиях назначения антиэстрогенных препаратов.