Выяснение путей биосинтеза болденона в семенниках лошадей

Болденон — анаболический андрогенный стероид, запрещённый в конном спорте. В моче некастрированных жеребцов содержится болденон, который, предположительно, имеет эндогенное происхождение; поэтому на международном уровне установлена пороговая концентрация («порог отсечения») свободного и конъюгированного болденона, позволяющая отличать случаи допинга от его естественной продукции. Вероятным источником болденона являются семенники. Проведён качественный анализ экстрактов гомогенатов ткани семенников лошадей (n = 3), инкубированных без добавок и в присутствии потенциальных предшественников, методом жидкостной хроматографии в сочетании с тандемной масс-спектрометрией (LC-MS/MS) и жидкостной хроматографии с масс-спектрометрией высокого разрешения (LC-HRMS). Для повышения достоверности идентификации образцы анализировали как без дериватизации, так и после дериватизации. Помимо ранее описанных эндогенных стероидов, в образцах ткани семенников без добавок были выявлены следовые количества болденона и болдиенона. Инкубация гомогенатов с тестостероном и андростендионом, меченными изотопами водорода или углерода, привела к образованию соответствующих аналогов болденона и болдиенона со стабильной изотопной меткой. Кроме того, был обнаружен 2-гидроксиандростендион, меченный изотопами водорода и углерода, что позволяет предположить, что этот стероид является промежуточным продуктом биосинтеза. Таким образом, болденон и болдиенон естественным образом присутствуют в семенниках лошадей, а их биосинтез связан с превращением тестостерона и андростендиона. Однако для более точной характеристики участвующих путей необходимы дальнейшие исследования с большим числом животных, дополнительные эксперименты по кинетике ферментативных реакций и чистые референсные стандарты изомеров 2-гидроксиандростендиона.