Критерии различения естественного присутствия и незаконного применения болденона, эфиров болденона и болдиона у крупного рогатого скота. 2. Прямое определение сульфоконъюгата 17β-болденона в моче телят методом жидкостной хроматографии с высокоразрешающей и тандемной масс-спектрометрией

Болденон запрещён в Европейском союзе (Директива 96/22/EC) в качестве стимулятора роста у животных, предназначенных для производства мяса. Болдион (ADD), болденон и эфиры болденона (главным образом ундециленат) доступны в продаже в виде анаболических препаратов для применения у людей, лошадей или крупного рогатого скота. С конца 1990-х годов у крупного рогатого скота описывали естественное присутствие метаболитов болденона. Согласно законодательству Европейского союза, однозначное подтверждение введения болденона крупному рогатому скоту должно основываться на выявлении болденона в соответствующей фракции конъюгатов мочи. Разработан и валидирован в соответствии с действующими стандартами аналитический метод, основной задачей которого было определение интактного сульфата 17β-болденона. Аналитическая процедура включала непосредственные экстракцию и очистку целевого аналита на картриджах с октадецилсилильной фазой, а также прямое выявление метаболита II фазы методом жидкостной хроматографии с отрицательной ионизацией электрораспылением и тандемной масс-спектрометрией (QqQ) либо высокоразрешающей масс-спектрометрией (Orbitrap). Предел принятия решения (CCα) и способность обнаружения (CCβ) составляли соответственно 0,2 и 0,4 мкг/л при использовании тройного квадрупольного масс-спектрометра и 0,1 и 0,2 мкг/л при использовании гибридной системы. Метод успешно применили для анализа образцов, полученных в различных экспериментах после введения препаратов. Сульфат 17β-болденона выявлялся в течение 36 ч после перорального введения болдиона и в течение 30 дней после внутримышечного введения болденона ундецилената. Эту форму конъюгата никогда не обнаруживали у необработанных животных, что подтверждает её статус окончательного кандидата на роль специфичного маркера введения болденона телятам.