Длинная некодирующая РНК MALAT-1 подавляет апоптоз и нарушение метаболизма матрикса при воспалении суставных хондроцитов, вызванном интерлейкином 1β, через сигнальный путь JNK

Такие провоспалительные цитокины, как интерлейкин 1β (IL-1β), вызывают воспаление суставного хряща. В этом исследовании изучали защитное действие длинной некодирующей РНК MALAT-1 на пролиферацию клеток, апоптоз и метаболизм матрикса при воспалении суставных хондроцитов, вызванном IL-1β. Хондроциты суставного хряща выделяли из коленных суставов здоровых крыс и культивировали; затем их идентифицировали с помощью окрашивания толуидиновым синим и иммунноцитохимического окрашивания на COL II. Пролиферацию хондроцитов второго пассажа оценивали с помощью анализа с бромидом 3-(4,5-диметил-2-тиазолил)-2,5-дифенил-2H-тетразолия (MTT). Воспалительные хондроциты, индуцированные IL-1β в концентрации 10 нг/мл, идентифицировали с помощью окрашивания толуидиновым синим и иммунноцитохимического окрашивания на COL II. В хондроциты трансфицировали pcDNA 3.1 и pcDNA-MALAT-1. Ультраструктуру хондроцитов исследовали с помощью трансмиссионной электронной микроскопии. Жизнеспособность хондроцитов оценивали методом MTT. Апоптоз хондроцитов оценивали с помощью окрашивания Hoechst 33258 и проточной цитометрии. В дальнейших экспериментах использовали хондроциты второго пассажа, сохранявшие биологические характеристики хондроцитов. После воздействия IL-1β скорость роста хондроцитов снижалась, клетки становились узкими и вытянутыми, в них появлялись вакуоли, а их форма становилась неправильной. Интенсивность окрашивания толуидиновым синим и иммуногистохимического окрашивания на COL II снижалась. В ответ на воздействие IL-1β экспрессия MALAT-1 в суставных хондроцитах снижалась; кроме того, наблюдалось выраженное повреждение хряща, снижались жизнеспособность хондроцитов и экспрессия Col II, а апоптоз хондроцитов, экспрессия MMP-13 и p-JNK повышались. При трансфекции pcDNA-MALAT-1 повреждение хряща уменьшалось, жизнеспособность хондроцитов и экспрессия коллагена II типа (Col II) повышались, а апоптоз хондроцитов, экспрессия MMP-13 и p-JNK снижались. В совокупности полученные результаты показывают, что длинная некодирующая РНК MALAT-1 блокировала активацию сигнального пути JNK, тем самым уменьшая вызванное IL-1β воспаление суставных хондроцитов, усиливая их пролиферацию и подавляя апоптоз и деградацию внеклеточного матрикса.