Поиск новых длительно выявляемых метаболитов метенолона и дростанолона в моче методом газовой хроматографии с масс-спектрометрией с акцентом на негидролизованные сульфаты

Показано, что сульфатные метаболиты могут служить длительно сохраняющимися маркерами злоупотребления анаболическими-андрогенными стероидами (ААС). В 2019 году была продемонстрирована совместимость газовой хроматографии с масс-спектрометрией (ГХ-МС) с негидролизованными сульфатированными стероидами, что впоследствии позволило включить эти соединения в расширенную процедуру первичного тестирования методом ГХ-МС. Однако необходимо установить, какие из них имеют практическую ценность. В этом исследовании в ходе двух исследований экскреции для каждого из двух широко применяемых ААС — метенолона и дростанолона — проводили поиск новых длительно выявляемых метаболитов. Образцы мочи анализировали методом газовой хроматографии с химической ионизацией и тандемной масс-спектрометрией с тройным квадруполем (ГХ-ХИ-МС/МС) после применения трёх отдельных методов подготовки образцов: гидролиза β-глюкуронидазой, полученной из Escherichia coli, гидролиза β-глюкуронидазой/арилсульфатазой, полученной из Helix pomatia, и анализа негидролизованных сульфатированных стероидов. Для метенолона впервые был описан негидролизованный сульфатный метаболит 1β-метил-5α-андростан-17-он-3ζ-сульфат, обеспечивший наиболее длительный период выявления — до 17 дней. По сравнению с маркерами метенолона, которые в настоящее время контролируют в рамках стандартной процедуры первичного тестирования при допинг-контроле, этот метаболит почти вдвое увеличивал период выявления. Во втором исследовании экскреции он увеличивал это окно на 25%. В случае дростанолона наиболее длительно выявляемым негидролизованным сульфатным метаболитом оказался сульфатированный аналог основного метаболита дростанолона (3α-гидрокси-2α-метил-5α-андростан-17-она), выявлявшийся до 24 дней. Однако основной метаболит дростанолона, который в настоящее время контролируют в рамках стандартного допинг-контроля после гидролиза глюкуронидазой из E. coli, сохранял преимущество по длительности выявления — до 29 дней.