Антиплазмодийная активность гидроэтанольного экстракта коры Bridelia atroviridis Müll. Arg. (Euphorbiaceae) in vitro и in vivo и фитохимический анализ методом LC–MS

Этнофармакологическая значимость: Малярия представляет собой угрожающую жизни проблему здравоохранения во всём мире, а её лечение по-прежнему сопряжено с серьёзными трудностями. Природные соединения лекарственных растений могут служить перспективным источником новых эффективных противомалярийных препаратов.

Цель: Оценить антиплазмодийную активность гидроэтанольного экстракта коры Bridelia atroviridis in vitro и in vivo.

Материалы и методы: Фитохимическую характеристику экстракта Bridelia atroviridis проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии–масс-спектрометрии (ВЭЖХ-МС). Цитотоксичность в отношении клеток Vero оценивали с помощью теста на основе резазурина, а антиплазмодийную активность in vitro определяли в отношении Plasmodium falciparum (штамм Dd2, устойчивый к хлорохину) методом флуоресцентного анализа на основе SYBR Green I. Исследование in vivo проводили на крысах, инфицированных Plasmodium berghei, которым в течение 5 дней ежедневно вводили дистиллированную воду (10 мл/кг; контроль малярии), сульфат хлорохина (25 мг/кг; положительный контроль) либо экстракт B. atroviridis в дозах 50, 100 и 200 мг/кг в трёх опытных группах. Паразитемию ежедневно оценивали в тонких мазках крови, окрашенных 10%-м раствором по Гимзе. После завершения лечения животных умерщвляли, забирали кровь для гематологического и биохимического анализа, а органы — для биохимического и гистопатологического исследования.

Результаты: По данным ВЭЖХ-МС, экстракт B. atroviridis содержал бриделионозид D, изомирицистрин, корилагин, мирицетин и ещё 5 неидентифицированных соединений. Bridelia atroviridis продемонстрировала высокую антиплазмодийную активность in vitro: значение IC50 составило 8,08 мкг/мл; цитотоксичность была низкой, поскольку средняя цитотоксическая концентрация (CC) превышала 100 мкг/мл. Экстракт B. atroviridis значимо снижал паразитемию (p < 0,05); эффективная доза 50 (ЭД50) составила 89 мг/кг. Экстракт также предотвращал развитие анемии, лейкоцитоза и поражения печени и почек, снижая концентрации трансаминаз, щелочной фосфатазы, креатинина, мочевой кислоты и триглицеридов. Кроме того, он снижал уровни некоторых провоспалительных цитокинов (TNF-α, IL-1β, IL-6) и значимо улучшал противовоспалительный статус (p < 0,01) инфицированных животных, что характеризовалось снижением концентрации IL-10. Эти результаты дополнительно подтверждались улучшением антиоксидантного статуса и почти нормальной микроархитектоникой печени, почек и селезёнки в опытных группах. В целом гидроэтанольный экстракт коры Bridelia atroviridis продемонстрировал противомалярийные свойства, что подтверждает обоснованность его применения в традиционной медицине для лечения малярии.5050