Механизм действия частухи восточной при лечении неалкогольной жировой болезни печени

В исследовании методы сетевой фармакологии сочетали с молекулярным докингом и экспериментальной проверкой, чтобы определить активные компоненты частухи восточной, потенциальные мишени и механизм её действия при неалкогольной жировой болезни печени (НАЖБП), а также создать основу для её клинического применения. Активные компоненты частухи восточной отбирали с помощью базы данных фармакологии китайской медицины (TCMSP). Потенциальные мишени, связанные как с активными компонентами, так и с НАЖБП, прогнозировали по базам данных белков с учётом пероральной биодоступности (OB) и лекарствоподобия (DL). С помощью программы Cytoscape построили сеть «активный компонент — потенциальная мишень» и провели молекулярный докинг активных компонентов с потенциальными мишенями. Анализ путей KEGG и обогащения выполняли с использованием базы данных DAVID для аннотирования биологической информации. Для анализа GO-аннотации мишеней применяли программу ClueGO. Уровни экспрессии белков определяли методом иммуноблоттинга и с помощью иммуноцитохимического анализа, а образование активных форм кислорода (АФК) оценивали с использованием флуоресцентного зонда. В базе данных и аналитической платформе TCMSP выявили 7 активных компонентов частухи восточной и отобрали 140 связанных с ними мишеней. После пересечения мишеней, связанных с заболеванием и компонентами, получили 59 потенциальных мишеней. Молекулярный докинг показал, что 7 активных компонентов частухи восточной могут взаимодействовать с потенциальными мишенями, включая 3-гидрокси-3-метилглутарил-коэнзим-А-редуктазу (HMGCR) и нерецепторную тирозинфосфатазу типа 1 (PTPN1). Согласно анализу обогащения KEGG, потенциальные мишени были преимущественно связаны с регуляцией воспалительных медиаторов, инсулинорезистентностью, взаимодействием нейроактивных лигандов с рецепторами, сокращением гладкой мускулатуры сосудов, фагоцитозом, опосредованным FcγR, и другими путями, связанными с TRP-каналами. Анализ обогащения GO показал, что потенциальные мишени преимущественно влияют на сигнальный путь рецепторов, сопряжённых с G-белком, транспорт органических гидроксильных соединений, положительную регуляцию биосинтеза липидов и положительную регуляцию липидного обмена. Иммуноблоттинг, иммуноцитохимический анализ и применение флуоресцентного зонда подтвердили, что экстракт частухи восточной эффективно снижает уровни экспрессии белков HMGCR и PTPN1, а также образование АФК в клетках HepG2. Исследование систематически показало, что частуха восточная воздействует на НАЖБП посредством нескольких компонентов, мишеней и сигнальных путей. Полученные данные создают теоретическую и научную основу для клинического применения частухи восточной.