Противоопухолевое действие и фитохимический профиль экстракта Achillea ketenoglui в отношении клеточных линий колоректального рака человека

Введение: В лечении колоректального рака (КРР) продолжается поиск новых противоопухолевых препаратов с меньшим числом побочных эффектов и более высокой эффективностью. Значительная часть этих исследований посвящена лекарственным растениям и полученным из них компонентам. Achillea ketenoglui относится к числу таких лекарственных растений, однако его противоопухолевый потенциал ранее не изучали.

Методы: Определяли содержание фенольных соединений и флавоноидов, а также антиоксидантную активность экстрактов A. ketenoglui. Фитохимическое профилирование и количественный анализ основных компонентов проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрией высокого разрешения с ионизацией электрораспылением (HPLC-ESI-Q-TOF-MS). Для оценки противоопухолевой активности экстракта в клетках КРР (HCT 116 и HT-29) исследовали цитотоксичность, пролиферацию, апоптоз и клеточный цикл. Выявленную противоопухолевую активность подтверждали анализом экспрессии мРНК методом ОТ-ПЦР в реальном времени (RT-qPCR) и анализом белков методом вестерн-блоттинга.

Результаты: Метанольный экстракт A. ketenoglui характеризовался высоким содержанием фенольных соединений (281,89 ± 0,23) и флавоноидов (33,80 ± 0,15), а также антиоксидантной активностью (IC40 0,03 ± 0,38). Согласно результатам теста XTT, экстракт обладал выраженной цитотоксической активностью: IC50 составила 350 мкМ для клеток HCT 116 и 263 мкМ для клеток HT-29. Наиболее распространёнными соединениями растения в порядке убывания были хлорогеновая кислота, апигенин, генистин, байкалин, эупаторин, кастицин и лютеолин. При проточной цитометрии установлено, что экстракт вызывал более выраженный апоптоз и остановку клеточного цикла в обеих клеточных линиях по сравнению с отрицательным и положительным контролями (кастицином). Согласно результатам анализа экспрессии мРНК, воздействие экстракта повышало экспрессию ключевых генов клеточного цикла и апоптоза, включая p53, p21, каспазу-3 и каспазу-9. При анализе экспрессии белков в обеих клеточных линиях, обработанных экстрактом, наблюдалось повышение экспрессии каспазы-3 и p53. Кроме того, в клетках HT-29 повышалась экспрессия каспазы-9.

Выводы: Полученные данные свидетельствуют о противоопухолевом потенциале A. ketenoglui, который реализуется за счёт индукции апоптоза и остановки клеточного цикла опухолевых клеток; растение может представлять интерес для терапии КРР. Вероятно, этот потенциал обусловлен синергическим действием впервые идентифицированных компонентов растения.