РНК-секвенирование для оценки влияния дефицита цинка на Microsporum canis: ген ZafA важен для роста и патогенности

Microsporum canis — распространённый патогенный гриб кожи, вызывающий дерматофитоз у людей и животных. Цинк — важный микроэлемент, необходимый для роста и метаболизма грибов. Влияние дефицита цинка на рост, экспрессию генов и метаболические пути M. canis ранее не изучалось. В этом исследовании M. canis культивировали при ограниченном содержании цинка и провели РНК-секвенирование. Дефицит цинка резко подавлял рост гриба и вызывал значимое повышение или снижение экспрессии многих генов. Он также отрицательно влиял на экспрессию генов и метаболические пути M. canis. Экспрессия гена ZafA, кодирующего цинк-регулируемый транскрипционный активатор, значительно повышалась; его последовательность имела гомологию с Zap1. Таким образом, ZafA может быть основным транскрипционным фактором, регулирующим гомеостаз цинка. Для оценки функции ZafA впервые получили нокаутный штамм ZafA-hph M. canis с помощью трансформации, опосредованной Agrobacterium tumefaciens (ATMT). Сравнили рост в условиях in vitro, способность разлагать волосы, вирулентность и поглощение цинка у штамма ZafA-hph и дикого типа. Результаты показали, что ZafA играет важную роль в поглощении цинка, экспрессии генов цинковых транспортёров, росте и патогенности M. canis и может служить новой мишенью для лекарственных препаратов. Нарушение поглощения цинка может стать способом профилактики и контроля инфекции M. canis.