Разграничение введения болденона и его превращения ex vivo в моче кастрированных жеребцов

Болденон — анаболический андрогенный стероид, запрещённый в конном спорте. Однако в определённых ситуациях он может иметь эндогенное происхождение или, как предполагается, образовываться под действием микроорганизмов в моче, поэтому необходим метод разграничения этих источников. После идентификации Δ1-прогестерона и 20(S)-гидрокси-Δ1-прогестерона как потенциальных биомаркеров микробной активности в послескачечной моче кастрированных жеребцов (меринов; n = 158) исследовали наличие шести стероидов. В соответствии с данными о эндогенном происхождении болденона у ряда других видов при использовании сверхчувствительных методов его обнаруживали в низких концентрациях во всех образцах мочи (27,0–1330 пг/мл). Кроме того, тестостерон и андростендион выявляли в 157 образцах (≤12 400 и 944 пг/мл соответственно), болдиенон — в двух образцах (≤22,0 пг/мл), а 20(S)-гидрокси-Δ1-прогестерон — в 20 образцах (≤66,0 пг/мл). Δ1-прогестерон ни в одном из образцов, исследованных при поступлении в лабораторию, обнаружен не был. Превращение ex vivo болдиенона, болденона, андростендиона, Δ1-прогестерона и 20(S)-гидрокси-Δ1-прогестерона происходило после хранения образцов мочи при комнатной температуре в течение 7 дней, но не после хранения в холодильнике. Поскольку введение неправильно хранившегося корма также приводило к повышению концентрации 20(S)-гидрокси-Δ1-прогестерона, был предложен биомаркерный подход для различения введения стероидов. В ситуациях, когда концентрация болденона превышает предлагаемое пороговое значение для принятия мер, следует исследовать наличие Δ1-прогестерона и 20(S)-гидрокси-Δ1-прогестерона. Например, превышение концентрации Δ1-прогестерона 50 пг/мл или 20(S)-гидрокси-Δ1-прогестерона 100 пг/мл указывает на превращение ex vivo или употребление изменённого корма, а не на введение стероидов.