Новые тритерпеноиды из частухи подорожниковой, влияющие на захват ЛПНП клетками HepG2 посредством ингибирования PCSK9

Введение: С 2003 года пропротеиновая конвертаза субтилизин-кексинового типа 9 (PCSK9) рассматривается как эффективная и перспективная мишень для лечения атеросклеротических сердечно-сосудистых заболеваний. В настоящее время одобрены только два моноклональных антитела, применение которых, однако, ограничено высокой стоимостью — до 9000 долларов США за дозу — и способом введения. Поэтому поиск природных эффективных и более дешёвых низкомолекулярных альтернатив, ингибирующих PCSK9, является актуальной задачей.

Цель: Выявить природные низкомолекулярные соединения с гиполипидемической активностью, действующие через PCSK9, в частухе подорожниковой (Alisma plantago-aquatica).

Методы: Целенаправленное выделение тритерпеноидов из A. plantago-aquatica проводили методом LC-Orbitrap-QDa. Способность выделенных соединений усиливать захват DiI-ЛПНП оценивали по интенсивности флуоресценции с помощью системы высокосодержательного анализа изображений, а ингибирующую активность в отношении PCSK9 — с использованием набора Human PCSK9 Kit и методом иммуноблоттинга. Захват ЛПНП и уровень PCSK9 под воздействием целевого соединения в различных концентрациях, а также уровни соответствующей мРНК дополнительно оценивали с помощью соответствующего набора, qPCR и иммуноблоттинга.

Результаты: Из A. plantago-aquatica выделили шесть новых тритерпеноидов, включая три необычных нортритерпеноида (1–3) и три тритерпеноида протостанового типа (4–6), а также 34 известных соединения. Соединение 2 содержало меньше всего атомов углерода среди ранее описанных в этом растении нортритерпеноидов протостанового типа. Семнадцать тритерпеноидов продемонстрировали выраженную способность усиливать захват ЛПНП; выявлены соответствующие зависимости «структура—активность». Шесть тритерпеноидов могли усиливать захват ЛПНП клетками HepG2 за счёт ингибирования PCSK9. Наиболее выраженный эффект наблюдался у ализола G (28): ингибирование PCSK9 достигало 55,6%, при этом значительно повышались уровни мРНК или белка рецептора ЛПНП и одновременно снижались уровни мРНК или белка PCSK9.

Выводы: Тритерпеноиды протостанового типа могут стать новым источником ингибиторов PCSK9.