Кверцетин уменьшает выраженность НАЖБП посредством усиления митофагии печени, опосредованной AMPK

В последние годы во всём мире резко возросла частота неалкогольной жировой болезни печени (НАЖБП), однако препаратов, одобренных для лечения этого заболевания, пока нет. Кверцетин — природный флавоноид, широко распространённый в растениях и фруктах; сообщалось, что он уменьшает выраженность НАЖБП, но точный молекулярный механизм этого действия остаётся неясным. Цель исследования — дополнительно изучить возможный механизм действия кверцетина. Его благоприятное действие и лежащие в его основе механизмы оценивали в клеточных экспериментах и опытах на живых организмах с применением химических ингибиторов образования аутофагосом (3-метиладенин, 3-MA), аутофаголизосом (хлорохин, CQ), AMPK (соединение C, CC) и SIRT1 (селисистат, EX-527). Содержание внутриклеточных липидов и активных форм кислорода (АФК), функцию митохондрий, аутофагию и митофагию оценивали с помощью флуоресцентной маркировки, проточной цитометрии и конфокальной микроскопии. Также определяли экспрессию ключевых белков, связанных с аутофагией, митофагией и воспалением. В опытах на живых организмах кверцетин дозозависимо уменьшал выраженность НАЖБП, однако внутрибрюшинное введение 3-MA блокировало его благоприятное действие на массу тела и печени, уровни АЛТ и АСТ в сыворотке, содержание АФК в печени и воспаление. В клеточных экспериментах кверцетин уменьшал содержание внутриклеточных липидов (по результатам окрашивания Nile Red) и накопление АФК (по результатам окрашивания DHE); этот эффект также блокировался 3-MA или CQ. Кроме того, CC устраняло защитное действие кверцетина в отношении накопления липидов и АФК в клетках. CC также отменяло усиливающее аутофагию и противовоспалительное действие кверцетина, что показали результаты иммуноблоттинга и окрашивания Lyso-Tracker. Важно, что кверцетин усиливал митофагию — особую форму аутофагии, направленной на митохондрии; об этом свидетельствовали изменения уровней белков PINK1/Parkin и совместная локализация аутофагосом и митохондрий при иммунофлуоресцентном исследовании. Вмешательство с помощью CC также блокировало этот эффект. Исследование показывает, что кверцетин предотвращает развитие НАЖБП посредством митофагии, опосредованной AMPK, и позволяет предположить, что усиление митофагии за счёт повышения активности AMPK может стать перспективной терапевтической стратегией при НАЖБП.