Механизмы поступления цинка при активации тромбоцитов

Цинк (Zn) высвобождается тромбоцитами в ходе гемостатической реакции на повреждение. Внеклеточный цинк ([Zn]) инициирует активацию тромбоцитов после поступления в их цитозоль, однако механизмы, обеспечивающие это поступление, неизвестны. Изменения внутриклеточной концентрации цинка ([Zn]) измеряли во флуориметрическом анализе и методом проточной цитометрии в тромбоцитах, нагруженных флуозином-3. Активацию тромбоцитов оценивали методом агрегометрии с регистрацией светопропускания. Фосфопротеины выявляли методом иммуноблоттинга. Поступление [Zn] и последующая активация тромбоцитов подавлялись при блокаде натрий-кальциевого обменника, каналов TRP и ZIP7. Истощение запасов катионов регулировало поступление [Zn]. Стимуляция [Zn] приводила к фосфорилированию субстратов протеинкиназы C, лёгкой цепи миозина и интегрина β3. Активация тромбоцитов через GPVI или под действием Zn вызывала фосфорилирование ZIP7, зависимое от казеинкиназы 2, и повышение уровня [Zn], чувствительное к ингибированию Orai1, ZIP7 или путей, опосредованных IPR. Эти данные показывают, что тромбоциты распознают изменения концентрации [Zn] и реагируют на них посредством поступления цинка в цитозоль через каналы TRP и натрий-кальциевой обменник. Активация тромбоцитов приводит к выходу ZIP7 на клеточную поверхность, что дополнительно регулирует поступление [Zn]. Повышение уровня [Zn] способствует активации катионзависимых ферментов. Чувствительность поступления [Zn] к тапсигаргину указывает на функционирование механизма, связанного с опустошением внутриклеточных депо; этот путь предложено называть поступлением цинка, управляемым внутриклеточными депо (SOZE). Эти механизмы могут влиять на функцию тромбоцитов при тромбозе и гемостазе.