Бакучиол регулирует сигнальные пути TLR4/MyD88/NF-κB и Keap1/Nrf2/HO-1, защищая от острого повреждения лёгких, вызванного ЛПС, в экспериментах in vitro и in vivo

Бакучиол (Bak) оказывает защитное действие при остром повреждении лёгких (ОПЛ), однако молекулярные механизмы этого эффекта остаются неясными. Для изучения действия бакучиола и механизмов его влияния использовали модели ОПЛ, вызванного липополисахаридом (ЛПС), у крыс in vivo и в клетках RLE-6TN in vitro. Крыс распределили на четыре группы: контрольную, получавшую ЛПС, и две группы, получавшие ЛПС и бакучиол в дозах 30 или 60 мг/кг. Клетки RLE-6TN также распределили на четыре группы: контрольную, получавшую ЛПС, и две группы, получавшие ЛПС и бакучиол в концентрациях 10 или 20 мкМ. Содержание миелопероксидазы (MPO) и 4-гидрокси-2-ноненаля (4-HNE) определяли методом иммуногистохимии. Уровни TNF-α, IL-6 и IL-1β измеряли методом ИФА. Апоптоз оценивали с помощью окрашивания TUNEL и проточной цитометрии. Для оценки окислительного стресса определяли содержание малонового диальдегида (MDA), активность супероксиддисмутазы (SOD) и глутатионпероксидазы (GSH-Px), а также уровень активных форм кислорода (ROS). У крыс с ОПЛ, вызванным ЛПС, бакучиол уменьшал выраженность патологических изменений, отношение влажной массы лёгких к сухой, экспрессию MPO, а также содержание белка и количество клеток в бронхоальвеолярной лаважной жидкости (БАЛЖ). Бакучиол снижал секрецию TNF-α, IL-6 и IL-1β в БАЛЖ. В ткани лёгких он уменьшал содержание MDA и экспрессию 4-HNE, повышая активность SOD и GSH-Px. Кроме того, бакучиол подавлял апоптоз в лёгких, снижая экспрессию Bax и повышая экспрессию Bcl-2. В клетках RLE-6TN, обработанных ЛПС, бакучиол снижал уровни мРНК TNF-α, IL-6 и IL-1β, а также экспрессию белков iNOS и COX2. Он уменьшал содержание MDA и образование ROS, повышал активность SOD и GSH-Px. Бакучиол также подавлял апоптоз клеток, снижая экспрессию Bax и повышая экспрессию Bcl-2. Кроме того, бакучиол снижал экспрессию TLR4, MyD88, p-IκBα и p-p65. Он также подавлял экспрессию Keap1 и повышал уровни Nrf2 и HO-1. Бакучиол защищает от воспаления, окислительного стресса и апоптоза при ОПЛ, вызванном ЛПС, регулируя сигнальные пути TLR4/MyD88/NF-κB и Keap1/Nrf2/HO-1.