Определение кломифена в кератинсодержащих матрицах методом LC-MS/MS для целей допинг-контроля: выявляется ли однократный приём кломифена в волосах и срезах ногтей?

Кломифен — селективный модулятор эстрогеновых рецепторов. Препарат применяют для лечения женского бесплодия, однако в спорте его могут использовать для стимуляции секреции эндогенного тестостерона у мужчин. Поэтому Всемирное антидопинговое агентство запрещает его применение во всё время. Цель исследования — получить данные, которые помогут интерпретировать концентрации кломифена у спортсменов. Здоровый мужчина 62 лет однократно принял терапевтическую дозу кломифена (Clomid™, 50 мг). Пряди светлых волос длиной 4 см собрали через месяц после приёма. Волосы на теле (бороды, подмышечные, лобковые и волосы на груди), а также ногти рук и ног собирали в течение 4–5 месяцев. Ранее разработанный метод модифицировали для выявления и количественного определения кломифена в кератинсодержащих матрицах. Образцы массой 30 мг подвергали ультразвуковой обработке и инкубировали в 1 мл метанола с добавлением 200 пг кломифена-D (внутренний стандарт). После центрифугирования и выпаривания органической фазы образцы анализировали методом LC-MS/MS. Линейность метода для волос и срезов ногтей подтверждена в диапазоне 1–500 пг/мг. Пределы обнаружения и количественного определения составили 0,3 и 1 пг/мг соответственно. Кломифен обнаружили во всех исследованных образцах: 9 пг/мг в волосах головы, 28–486 пг/мг в волосах на теле и 4–57 пг/мг в ногтях. Это первое выявление кломифена в нескольких типах кератинсодержащих матриц. Исследование показало, что однократный приём терапевтической дозы препарата можно выявить в кератинсодержащих матрицах спустя длительное время.⁵