Одновременное количественное определение и идентификация интактных оксометаболитов нандролона II фазы методом дериватизации с последующим прямым вводом пробы в систему LC-MS/(HRMS)

Разработан и валидирован чувствительный и селективный метод дериватизации с последующим прямым вводом пробы для количественного определения интактных оксометаболитов нандролона II фазы с помощью жидкостной хроматографии — тандемной масс-спектрометрии высокого разрешения (LC-MS/(HRMS)). Для дериватизации непосредственно в образцы мочи добавляли реагент Жирара T (GRT), после чего метаболиты анализировали методом прямого ввода в систему LC-MS/(HRMS) в режиме положительной ионизации. Дериватизация обеспечивала эффективное выявление оксометаболитов нандролона и одновременно образование интенсивных продукт-ионов при диссоциации, индуцированной столкновениями (CID). Эти ионы были связаны со структурой стероидного скелета метаболитов, а не с конъюгированными группами. Глюкуронидные и сульфатные метаболиты нандролона разделяли хроматографически и количественно определяли за один анализ в диапазоне 1–100 нг/мл; при этом для каждого метаболита можно было установить структуру. Метод полностью валидировали в соответствии с Международным стандартом Всемирного антидопингового агентства (WADA) для лабораторий (ISL). Оксометаболиты нандролона количественно определяли в двух наборах образцов мочи: первый включал образцы, ранее признанные отрицательными, а второй — образцы, собранные в ходе двух исследований выведения после введения нандролона деканоата. Результаты определения глюкуронида 19-норандростерона (19-NAG) и глюкуронида 19-норэтиохоланолона (19-NEG) сравнили с результатами, полученными традиционным методом газовой хроматографии — масс-спектрометрии (GC-MS/[MS]).