Химический анализ, антибактериальное и противовоспалительное действие эфирного масла дикорастущего в Египте тысячелистника душистого (Achillea fragrantissima)

Введение: Тысячелистник душистый (Achillea fragrantissima; семейство Asteraceae) традиционно применяют для лечения кожных инфекций и воспаления. Целью настоящей работы было получение эфирных масел из надземных частей A. fragrantissima, широко произрастающего в Египте, и изучение их антибактериальной активности в отношении возбудителей кожных инфекций, а также противовоспалительной активности in vitro на клеточной модели.

Методы: Эфирные масла из свежих надземных частей растения получали гидродистилляцией (HD), микроволновой гидродистилляцией (MAHD) и методом парофазной экстракции (HS), а из высушенных частей — с использованием сверхкритической жидкости (SF). Полученные эфирные масла анализировали методом ГХ/МС. Антибактериальную активность оценивали в отношении Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Streptococcus pyogenes ATCC 12344 и Clostridium perfringens ATCC 13124 с помощью диффузии в агар, микролуночного разведения и тестов на образование биоплёнки. Противовоспалительную активность оценивали по уровням фактора некроза опухоли α (TNF-α), интерлейкинов 2 (IL-2) и 6 (IL-6) в клетках RAW 264.7, стимулированных липополисахаридом (LPS), с использованием иммуноферментного анализа; кроме того, экспрессию синтазы оксида азота (iNOS) измеряли методом вестерн-блоттинга.

Результаты: Наибольший выход эфирного масла был получен методом SF — 1,50 мл/г. На долю оксигенированных компонентов приходилась наибольшая доля в эфирных маслах, полученных всеми четырьмя методами: 84,14, 79,21, 73,29 и 33,57% для HS, HD, MAHD и SF соответственно. Количественный состав идентифицированных соединений также существенно различался. В эфирном масле, полученном методом HS, основными компонентами были α-туйон (29,37%), артемизион (19,59%) и сантолиновый спирт (14,66%), тогда как в масле, полученном методом HD, значимыми компонентами были α-туйон (20,38%) и пиперитон (12,09%). В масле, полученном методом MAHD, значимыми компонентами были (+)-спатуленол (12,22%) и пиперитон (10,48%), а в масле, полученном методом SF, — пиперитон (14,83%) и β-ситостерол (11,07%). Эфирные масла, полученные методами HD, MAHD и SF, проявляли активность в отношении P. aeruginosa (зона ингибирования 9–14 мм), E. coli (11–13 мм) и C. perfringens (10–14 мм) в тесте диффузии в агар. В микролуночном тесте разведения эфирные масла, полученные методом MAHD, продемонстрировали наиболее выраженное подавление роста всех исследованных микроорганизмов (МПК 0,25–2 мг/мл), за ними следовали масла, полученные методом HD (МПК 13–52 мг/мл). Значения минимальной бактерицидной концентрации были равны значениям МПК или превышали их. Кроме того, эфирные масла, полученные методом SF, подавляли образование биоплёнки у всех исследованных микроорганизмов на 65,12–80,84%. В частности, масла, полученные методами MAHD и HD, эффективно подавляли образование биоплёнки S. pyogenes (на 77,87%) и P. aeruginosa (на 60,29%) соответственно. Наконец, эфирные масла, полученные методами HD и SF, проявляли противовоспалительную активность, подавляя высвобождение TNF-α, IL-2 и IL-6, а также экспрессию iNOS в макрофагах RAW 264.7, стимулированных LPS.

Выводы: Эфирное масло A. fragrantissima богато оксигенированными летучими соединениями и обладает антибактериальной и противовоспалительной активностью. Его можно рассматривать как биоактивное средство для коррекции кожных инфекций, однако для оценки безопасности в клинических условиях необходимы дополнительные исследования.