Опухолевый G-CSF индуцирует иммуносупрессивное микроокружение в модели остеосаркомы и снижает ответ на CAR.GD2 Т-клетки

Саркомы — редкие мезенхимальные опухоли, составляющие около 10–15% всех злокачественных новообразований у детей. GD2 представляет собой подходящую мишень для терапии химерными антигенными рецепторами (CAR) вследствие его гиперэкспрессии при нескольких солидных опухолях. В этом доклиническом исследовании мы изучали потенциальное применение iCasp9.2A.GD2.CAR-CD28.4-1BBζ (CAR.GD2) Т-клеток для лечения пациентов с GD2-положительными саркомами и стремились выявить факторы, формирующие неблагоприятное микроокружение опухоли в данной ситуации. Экспрессию GD2 оценивали методом проточной цитометрии в образцах первичных опухолей у детей с саркомами. Экспрессию GD2 в клетках саркомы также оценивали после применения ингибитора энхансера гомолога 2 zeste (EZH2) таземетостата. Противоопухолевую активность CAR.GD2 Т-клеток оценивали in vitro и in vivo в доклинических моделях ортотопических и/или метастатических сарком мягких тканей и костей. Экспрессия GD2 выявлена в 55% первичных опухолей. Примечательно, что наиболее высокие уровни экспрессии GD2 наблюдались при остеосаркоме и альвеолярной рабдомиосаркоме, а наиболее низкие — при саркоме Юинга. CAR.GD2 Т-клетки обеспечивали значимый контроль опухоли in vitro и in vivo в моделях GD2-экспрессирующих опухолей. Предварительное лечение ингибитором EZH2 таземетостатом повышало экспрессию GD2 и усиливало чувствительность клеток саркомы к цитотоксической активности CAR.GD2 Т-клеток. Кроме того, в мышиных моделях диссеминированной рабдомиосаркомы и ортотопической остеосаркомы CAR.GD2 Т-клетки демонстрировали выраженную противоопухолевую активность и длительную персистенцию по сравнению с нетрансдуцированными Т-клетками. Наличие иммуносупрессивных миелоидных супрессорных клеток (MDSC) мыши значительно снижало длительную противоопухолевую активность введённых CAR.GD2 Т-клеток. Было установлено, что G-CSF, продуцируемый опухолью, является одним из ключевых факторов, стимулирующих расширение иммуносупрессивных MDSC у мышей и человека и тем самым косвенно ограничивающих эффективность CAR.GD2 Т-клеток. Полученные доклинические данные убедительно свидетельствуют о перспективности CAR.GD2 Т-клеток в качестве потенциального метода лечения пациентов с GD2-положительными саркомами. Для оптимизации активности CAR.GD2 Т-клеток необходимы стратегии преодоления иммуносупрессивного действия MDSC.