Двойные лиганды ядерных рецепторов NR4A1/NR4A2 ингибируют рост глиобластомы и воздействуют на TWIST1

Соединения 1,1-бис(3'-индолил)-1-(3,5-дизамещённый фенил)метан (DIM-3,5) представляют собой двойные лиганды, связывающиеся с обоими ядерными рецепторами-сиротами NR4A1 и NR4A2. Подавление экспрессии NR4A1 или NR4A2 с помощью РНК-интерференции в клетках глиобластомы снижало их рост и индуцировало апоптоз. Сходные эффекты наблюдались при применении аналогов DIM-3,5, обладающих активностью обратных агонистов и ингибирующих проонкогенную активность, опосредованную NR4A1 и NR4A2. Подавление экспрессии NR4A1 или NR4A2, а также лечение аналогами DIM-3,5 снижали экспрессию мРНК и белка TWIST1 в клетках глиобластомы на 40–90%. Проксимальная область промотора гена TWIST1 содержит функциональные GC-богатые участки связывания для Sp1 и Sp4; подавление экспрессии этих факторов транскрипции также снижало экспрессию TWIST1 в клетках глиобластомы. Дальнейший анализ с помощью иммунопреципитации хроматина, коиммунопреципитации белков и анализов связывания показал, что NR4A1 и NR4A2 совместно регулируют экспрессию гена TWIST1 как лиганд-зависимые кофакторы Sp1 и Sp4, взаимодействующие с проксимальными цис-регуляторными GC-богатыми участками промотора гена TWIST1. В исследованиях in vivo двойные обратные агонисты NR4A1/2 DIM-3,5 также снижали внутрив опухолевую экспрессию TWIST1 и значительно продлевали выживаемость мышей в сингенной мышиной модели глиобластомы, что свидетельствует о перспективности этих лигандов для воздействия на TWIST1 и лечения глиобластомы. Значимость: Ген TWIST1 представляет собой проонкогенный фактор, регулирующий эпителиально-мезенхимальный переход в клетках глиобластомы. Показано, что ядерные рецепторы-сироты NR4A1 и NR4A2 регулируют экспрессию TWIST1, на которую можно воздействовать с помощью двойных обратных агонистов NR4A1/2, производных бис-индола.