Жидкостно-хроматографическое определение флуоксиместерона в сыворотке крови человека с применением в предварительном исследовании биодоступности

Флуоксиместерон экстрагировали из сыворотки методом жидкость—жидкость. Сыворотку, содержащую препарат и внутренний стандарт — 6α-метилпреднизолон, — экстрагировали дихлорметаном. Экстракт промывали 0,1 М раствором гидроксида натрия и водой, упаривали и растворяли в подвижной фазе. Хроматографическое разделение выполняли на колонке Zorbax Sil с предколонкой; подвижная фаза состояла из 50% насыщенного водой бутилхлорида, тетрагидрофурана, метанола и фосфорной кислоты в соотношении 880:100:15:0,5. Флуоксиместерон и метилпреднизолон определяли по ультрафиолетовому поглощению при 236 нм. Общая степень извлечения составила 80%. Калибровочные кривые были линейными в диапазоне концентраций флуоксиместерона от 5 до 100 нг/мл. Метод характеризовался точностью и воспроизводимостью: значения относительного стандартного отклонения не превышали 7%; эндогенные стероиды не оказывали влияния на результаты анализа. Пригодность метода оценивали в исследовании биодоступности, в котором шесть испытуемых получили по две схемы лечения таблетками флуоксиместерона дозой 10 мг в перекрёстном исследовании по схеме латинского квадрата. В рамках двух схем таблетку вводили буккально или перорально. Значения максимальной концентрации составляли от 40 до 150 нг/мл, время достижения максимальной концентрации — 1–2 ч. Гармоническое среднее периода полувыведения флуоксиместерона составило 2,0 ч. На экстраполированный участок площади под кривой приходилось менее 8%. Средние значения максимальной концентрации и площади под кривой после перорального введения составляли соответственно 80 и 76% от средних значений после буккального введения.