Активность клеток GD2-CAR NK-92 против клеток нейробластомы не повышается при нокауте TIGIT

Иммунотерапия посредством ингибирования молекул иммунных контрольных точек стала важным методом лечения рака. Среди этих молекул ось «рецептор полиовируса/подобный рецептору полиовируса 2 (PVR/PVRL2) — TIGIT» была определена как потенциальная мишень при различных видах рака. Для нейробластомы (НБ) — наиболее распространённой экстракраниальной солидной опухоли у детей — эффективная терапия с ингибированием иммунных контрольных точек пока не разработана. Чтобы изучить ось PVR/PVRL2–TIGIT как новую мишень для лечения НБ, мы проанализировали влияние PVR и PVRL2 на выживаемость пациентов и подтвердили экспрессию этих рецепторов на клеточных линиях НБ. Для нарушения функционирования этой оси на клеточных линиях НБ выполнили одиночный и двойной нокаут генов соответствующих рецепторов, а затем удалили TIGIT — ингибирующий рецептор на иммунных эффекторных клетках — из клеток NK-92. Наконец, мы объединили ингибирование контрольной точки с применением клеток GD2-CAR NK-92 и оценили изменения цитотоксичности. По данным РНК-секвенирования экспрессия PVR и PVRL2 в клетках НБ коррелировала с более низкой бессобытийной выживаемостью пациентов. Нокаут генов PVR и PVRL2 с помощью CRISPR/Cas9 не повысил цитотоксическую активность клеток NK-92. В клетках NK-92 с дефицитом TIGIT мы наблюдали усиление лизиса клеток НБ. Однако цитотоксичность клеток GD2-CAR NK-92 значимо не усилилась. Таким образом, помимо взаимодействия PVR/PVRL2 с TIGIT на модифицированных иммунных эффекторных клетках, направленных против НБ, вероятно, имеют значение лиганды с множественной специфичностью. Удаление TIGIT из иммунных эффекторных клеток — перспективный способ защитить их от ингибирующих сигналов, связанных с опухолью, однако оно не усиливает эффект клеток GD2-CAR NK-92.