Вклад пробиотиков в комбинированную клеточную терапию заживления кожных ран у крыс с сахарным диабетом

Введение: Лечение ран, связанных с сахарным диабетом, по-прежнему остается серьезной проблемой из-за хронических незаживающих язв, склонных к инфицированию и в конечном итоге приводящих к ампутации. В последние годы широко применяются методы клеточной терапии, включая мезенхимальные стромальные клетки (МСК), плазму, обогащенную тромбоцитами (ПОТ), и стромально-сосудистую фракцию (ССФ). Комбинированная клеточная терапия (ККТ) ранее не изучалась в виде тройной комбинации, хотя применялись отдельные компоненты и их сочетания по два. Пробиотики ускоряют заживление, изменяя состав кишечной микробиоты. Цель исследования — изучить роль пробиотиков в усилении эффекта ККТ при заживлении диабетических ран.

Методы: Для формирования модели сахарного диабета животным внутрибрюшинно вводили стрептозотоцин в дозе 40 мг/кг, после чего создавали полнослойную кожную рану размером 1×1 см². Животных разделили на четыре группы: диабет, диабет + пробиотики, диабет + ККТ и диабет + ККТ + пробиотики; в каждой группе было по шесть взрослых крыс-альбиносов. Края раны обрабатывали раствором общим объемом 300 мкл, включавшим по 30 мкл препаратов МСК, ССФ и ПОТ объемом 100 мкл каждый; концентрация МСК составляла 1×10⁶ клеток. Пробиотики вводили перорально в дозе около 200 мг в сутки. Гистохимический анализ проводили с использованием окраски гематоксилином и эозином, а также трихромом по Массону. Иммуногистохимический анализ включал определение эндотелиальной синтазы оксида азота (eNOS), каспазы-3, интерлейкина-10 (IL-10), сосудистого эндотелиального фактора роста (VEGF) и коллагена I типа. Кишечную микробиоту исследовали методом метагеномного анализа таксономической структуры.

Результаты: Комбинированная клеточная терапия обеспечивала более эффективное и быстрое заживление у животных с сахарным диабетом. Было установлено, что пробиотики дополнительно ускоряют этот процесс и усиливают улучшение. На фоне ККТ отмечалось снижение исходно высокой экспрессии eNOS, каспазы-3 и IL-10, а также повышение исходно низких уровней VEGF и коллагена I типа. Кроме того, пробиотики значительно усиливали положительные эффекты ККТ. Сочетание ККТ с пробиотиками существенно улучшало заживление ран за счет предотвращения окислительного стресса, апоптоза и воспаления, а также стимуляции васкуляризации и упорядочивания коллагеновых волокон.

Выводы: Поддержка пробиотиками может иметь важное значение для заживления диабетических ран и, предположительно, способствовать повышению качества жизни пациентов.