Терапевтическая оценка и одноклеточный анализ стромально-сосудистой фракции жировой ткани, выделенной с помощью коммерческой системы разделения клеток

Введение: В области регенеративной терапии стромально-сосудистая фракция (ССФ), выделенная из жировой ткани, широко признана благодаря значимому терапевтическому потенциалу. Однако клеточный состав и терапевтический эффект продуктов ССФ, полученных различными методами, остаются неясными.

Методы: Клетки ССФ получали тремя способами: (1) механической эмульсификацией (M-SVF), (2) ферментативной обработкой в лаборатории (L-SVF) и (3) с использованием коммерческой системы разделения клеток (C-SVF). Оценивали влияние полученных препаратов на заживление ран у мышей. Кроме того, для изучения клеточного состава C-SVF применяли секвенирование РНК отдельных ядер (snRNA-seq).

Результаты: Выход клеток при получении C-SVF был сопоставим с таковым при использовании L-SVF. В условиях культивирования in vitro C-SVF характеризовалась более высокой пролиферацией и меньшей долей апоптотических клеток. В модели ран у мышей применение C-SVF ускоряло закрытие ран, улучшало ремоделирование коллагена и ангиогенез в области повреждения. Дополнительный анализ методом snRNA-seq показал, что C-SVF обогащена APOE-положительными стволовыми клетками жировой ткани и иммунными клетками, особенно противовоспалительными макрофагами M2, которые совместно регулируют и стимулируют заживление ран.

Выводы: Коммерческая система выделения — эффективный метод получения жизнеспособных клеток ССФ, обогащённой APOE-положительными стволовыми клетками жировой ткани и макрофагами M2.