Проантоцианидины подавляют воспаление при синдроме сухого глаза, регулируя сигнальный путь IRAK4/JAK1/STAT1

Стойкое воспаление глазной поверхности остаётся нерешённой проблемой при синдроме сухого глаза (ССГ). Цель исследования — изучить терапевтическое действие проантоцианидинов (PA) и возможный механизм их действия при ССГ в экспериментах in vitro и in vivo. Потенциальные мишени PA прогнозировали и анализировали методами биоинформатики. В экспериментальной части уровни IRAK4, JAK1 и STAT1 оценивали методом иммуноблоттинга, жизнеспособность клеток — с помощью теста CCK-8, а экспрессию MMP9 и TNF-α в клетках и эпителии роговицы мышей — методом иммунофлуоресценции. Концентрации MMP9 и TNF-α в культуральной среде определяли методом ИФА. Флуоресцеиновое окрашивание роговицы и секрецию слёз у мышей оценивали с помощью флуоресцеина натрия и фенолового красного. Биоинформатический анализ выявил IRAK4, STAT1 и PTGS1 как ключевые мишени, связанные с PA и обогащённые в путях, связанных с воспалением. Гиперосмолярный стресс повышал экспрессию IRAK4 и одновременно подавлял фосфорилирование JAK1/STAT1 в клетках HCE-T. PA значительно снижали уровень IRAK4, восстанавливали экспрессию фосфорилированных форм JAK1 и STAT1 и подавляли выработку MMP9 и TNF-α in vitro и in vivo. Кроме того, PA усиливали пролиферацию и миграцию клеток HCE-T в условиях гиперосмолярного стресса. У мышей с ССГ местное применение PA заметно улучшало секрецию слёз, снижало выраженность окрашивания роговицы и уменьшало экспрессию IRAK4, MMP9 и TNF-α в эпителии роговицы. PA ослабляют воспаление глазной поверхности и улучшают проявления ССГ, воздействуя на сигнальный путь IRAK4/JAK1/STAT1. Полученные данные указывают на перспективность PA в качестве средства для лечения ССГ и раскрывают новые механизмы регуляции воспаления, опосредованной IRAK4.