Иммуноанализы для определения паратиреоидного гормона

Биологически активный паратиреоидный гормон (ПТГ) у людей с нормальной функцией почек циркулирует преимущественно в виде пептида, состоящего из 84 аминокислот. Фрагменты ПТГ различной длины образуются в результате метаболизма интактного гормона в околощитовидных железах или периферических тканях, например в печени; образующиеся карбоксильные фрагменты выводятся главным образом посредством клубочковой фильтрации с последующей деградацией в канальцах. Большинство первых антисывороток к ПТГ были направлены против эпитопов, расположенных в среднем или карбоксильном участке гормона. Эти антитела использовали для разработки обычных конкурентных радиоиммуноанализов, однако они позволяли лишь косвенно оценить содержание биологически активного ПТГ(1–84) в крови. Впоследствии были разработаны иммуноометрические методы, в которых применяют два различных антитела: захватывающее антитело, обычно направленное против карбоксильного участка ПТГ(1–84), и радиоактивно- или ферментно-меченое детектирующее антитело, обычно направленное против аминокислотного конца гормона. Считалось, что такие методы определяют преимущественно, если не исключительно, интактный ПТГ и тем самым позволяют измерить концентрацию биологически активного гормона в крови, что особенно важно для диагностики гиперпаратиреоза. Однако исследование образцов сыворотки здоровых людей и пациентов с первичным или вторичным гиперпаратиреозом показало, что большинство двухсайтовых иммуноометрических «сэндвич»-методов, помимо ПТГ(1–84), определяют один или несколько недавно выявленных крупных карбоксильных фрагментов ПТГ, в которых отсутствует часть аминокислотного конца молекулы. Некоторые из этих молекул ПТГ с укороченным аминокислотным концом [ntPTH(1–84)] имеют при высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) профиль элюции, неотличимый от профиля синтетического ПТГ(7–84). Ранее считалось, что такие пептиды обладают минимальной биологической активностью или не обладают ею вовсе, однако недавние исследования показали, что синтетический ПТГ(7–84) оказывает гипокальциемическое действие in vivo, а in vitro подавляет резорбцию костной ткани остеокластами и образование зрелых остеокластов. В настоящее время неясно, позволяют ли сравнения результатов, полученных с помощью более старых иммуноометрических методов, определяющих полноразмерный гормон и ntPTH(1–84), и новых методов, определяющих только ПТГ(1–84), выявить существенные различия при разных заболеваниях. Поэтому, хотя большинство иммуноометрических систем определения ПТГ подходят для диагностики первичного гиперпаратиреоза, методы, предназначенные для определения только ПТГ(1–84), могут оказаться более полезными в отдельных диагностических исследованиях, при интраоперационном мониторинге ПТГ и оценке пульсирующего характера его секреции. Кроме того, возможность различать относительные концентрации ntPTH(1–84) и ПТГ(1–84) может выявить ранее не предполагавшуюся роль фрагментов ntPTH(1–84) в патофизиологии пациентов с терминальной почечной недостаточностью и/или другими заболеваниями, связанными с нарушением функции околощитовидных желез.