Станозолол активирует взаимодействие сигнальных путей рецептора эстрогена α, рецептора инсулиноподобного фактора роста 1 и внеклеточной сигнал-регулируемой киназы 1/2 в хондроцитах ростковой зоны подростковых крыс с подавленной продукцией эстрогенов in vitro

Цель: Изучить влияние станозолола (ST) и механизмы его действия на пролиферацию, созревание и дифференцировку хондроцитов ростковой зоны, выделенных из подростковых крыс, получавших аналог гонадотропин-рилизинг-гормона (GnRHa), и культивированных in vitro; определить, опосредует ли ST пролиферацию хондроцитов через рецептор эстрогена α (ERα), андрогенный рецептор (AR) и/или рецептор инсулиноподобного фактора роста 1 (IGF-1R), а также изучить взаимодействие сигнальных путей этих рецепторов на молекулярном уровне, чтобы выяснить механизм биологического действия ST, способствующего росту и созреванию костей.

Методы: Крыс отняли от матерей в конце 3-й недели жизни, после чего начали внутримышечно вводить трипторелин — препарат GnRHa — один раз в 2 недели, всего 2 инъекции. В конце 7-й недели животных умерщвляли и в стерильных условиях выделяли ростковые зоны большеберцовых костей. Хондроциты получали методом двукратного ферментативного расщепления; исследования проводили на первичной культуре хондроцитов. Использовали иммуногистохимическое окрашивание на ядерный антиген пролиферирующих клеток (PCNA) и иммуноблоттинг.

Результаты: По данным определения PCNA, станозолол усиливал пролиферацию хондроцитов. В ходе исследования временной зависимости максимальная стимуляция пролиферации наблюдалась после 2 суток инкубации со станозололом, а при более длительной инкубации эффект вновь снижался. Экспрессия фосфорилированных ERα, IGF-1R и внеклеточной сигнал-регулируемой киназы 1/2 (ERK1/2) увеличивалась по мере продолжительности воздействия ST, достигала пикового значения в определённый момент, а затем постепенно снижалась. При повышении концентрации ST экспрессия фосфорилированных ERα, IGF-1R и ERK1/2 также возрастала, достигая максимума при концентрации 10⁻⁹–10⁻⁸ моль/л, после чего постепенно снижалась. Индуцированная ST экспрессия фосфорилированного ERα частично подавлялась ингибиторами ERα и митоген-активируемой протеинкиназы-киназы. Индуцированная ST экспрессия фосфорилированного IGF-1R частично подавлялась ингибиторами ERα и IGF-1R. Индуцированная ST экспрессия фосфорилированного ERK1/2 частично подавлялась ингибиторами митоген-активируемой протеинкиназы-киназы и IGF-1R.

Выводы: Станозолол, являясь производным андрогенов, стимулирует пролиферацию хондроцитов ростковой зоны длинных костей посредством активации классического сигнального пути ERα и митоген-активируемого протеинкиназного пути, одновременно активируя IGF-1R. IGF-1R и ERα могут обеспечивать перекрестное взаимодействие сигнальных путей этих двух рецепторных систем через митоген-активируемый протеинкиназный путь.