Быстрое определение тадалафила в плазме крови и семенной плазме человека методом жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией

Разработан и валидирован селективный, чувствительный и быстрый метод обращённо-фазовой жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией (LC-MS/MS) для количественного определения тадалафила в плазме крови и семенной плазме человека. Подготовка образцов включала экстракцию метил-трет-бутиловым эфиром в щелочных условиях. Тадалафил разделяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии на колонке C18 при изократическом режиме с подвижной фазой, состоящей из метанола и 2 мМ ацетата аммония с добавлением 0,05% муравьиной кислоты в воде, в соотношении 52:48 (об./об.), при скорости потока 0,2 мл/мин; продолжительность анализа составляла 5 мин. Детектирование проводили на тандемном масс-спектрометре с тройным квадруполем в режиме мониторинга множественных реакций (MRM) с использованием электроспрей-ионизации (ESI); домперидон применяли в качестве внутреннего стандарта. Калибровочные кривые были линейными в диапазонах концентраций тадалафила 2–1000 нг/мл в плазме крови и 2–100 нг/мл в семенной плазме; нижний предел количественного определения для обеих матриц составлял 2 нг/мл. Внутрисуточные и межсуточные точность и прецизионность для всех образцов контроля качества в обеих матрицах соответствовали общепринятым критериям валидации биоаналитических методов: значения относительного стандартного отклонения (RSD) были ниже 15%, а относительная ошибка (RE) составляла от 1,44 до 8,32% для плазмы крови и от −3,12 до 7,71% для семенной плазмы. Валидированный метод применим для клинического фармакокинетического исследования тадалафила у здоровых добровольцев после его приема внутрь, а также для дальнейшего изучения связи между распределением тадалафила в плазме крови и семенной плазме человека и его возможным влиянием на качество сперматозоидов.