Функциональная оценка C-концевых вариантов рианодинового рецептора 1, ассоциированных с центральной стержневой болезнью или злокачественной гипертермией

Введение: Центральная стержневая болезнь и злокачественная гипертермия — заболевания скелетных мышц у человека, обусловленные нарушением регуляции Ca2+. Большинство случаев злокачественной гипертермии и центральной стержневой болезни связано с аминокислотными заменами в рианодиновом рецепторе 1 (RyR1) — канале высвобождения Ca2+ в скелетных мышцах. Для злокачественной гипертермии характерен фенотип с усилением функции, тогда как центральная стержневая болезнь обусловлена утратой функции канала. Чтобы классифицировать вариант как патогенный, функциональные исследования должны продемонстрировать его связь с патофизиологией злокачественной гипертермии или центральной стержневой болезни.

Цель: Оценить патогенность четырёх C-концевых вариантов рианодинового рецептора с помощью функционального анализа. Эти варианты были выявлены в семьях, в которых наблюдалась злокачественная гипертермия или центральная стержневая болезнь.

Методы: Каждый из четырёх вариантов по отдельности вводили в кДНК человека, кодирующую рианодиновый рецептор скелетных мышц. После временной экспрессии в клетках HEK-293T проводили функциональные исследования с использованием тестов высвобождения кальция в ответ на агонист. В качестве контроля использовали два ранее охарактеризованных варианта и рианодиновый рецептор скелетных мышц дикого типа.

Результаты: Вариант p.Met4640Ile, ассоциированный с центральной стержневой болезнью, не отличался от дикого типа по высвобождению кальция. Вариант p.Val4849Ile, ассоциированный со злокачественной гипертермией, был более чувствителен к агонисту, чем дикий тип, однако различие не достигло статистической значимости. Два варианта, ассоциированные с центральной стержневой болезнью, p.Phe4857Ser и p.Asp4918Asn, были полностью неактивны.

Выводы: Вариант p.Val4849Ile следует рассматривать как фактор риска злокачественной гипертермии, а варианты p.Phe4857Ser и p.Asp4918Asn — классифицировать как патогенные при центральной стержневой болезни.