Диагностика хронического эндометрита у бесплодных бессимптомных женщин: сравнительное исследование гистологии, микробиологических посевов, гистероскопии и молекулярной микробиологии

Введение: Хронический эндометрит — это персистирующее воспаление слизистой оболочки эндометрия, вызванное бактериальными патогенами, такими как Enterobacteriaceae, Enterococcus, Streptococcus, Staphylococcus, Mycoplasma и Ureaplasma. Хотя хронический эндометрит может протекать бессимптомно, он выявляется у 40% бесплодных пациенток и является причиной повторных неудач имплантации и привычного невынашивания беременности. Диагностика хронического эндометрита основана на гистероскопии полости матки и биопсии эндометрия с гистологическим выявлением плазматических клеток, тогда как специфическое лечение определяют по результатам микробиологического посева. Однако не все вовлеченные микроорганизмы легко или быстро культивируются, и получение результата может занимать до 1 недели.

Цель: Мы стремились разработать молекулярный диагностический инструмент для хронического эндометрита на основе полимеразной цепной реакции в реальном времени, эквивалентный одновременному использованию трех классических методов и позволяющий преодолеть смещение, возникающее при использовании любого из них по отдельности.

Методы: Образцы эндометрия от пациенток, обследованных на хронический эндометрит (n = 113) с использованием по крайней мере одного или нескольких традиционных методов диагностики, а именно гистологии, гистероскопии и/или микробиологического посева, были вслепую оценены методом полимеразной цепной реакции в реальном времени на наличие 9 патогенов хронического эндометрита: Chlamydia trachomatis, Enterococcus, Escherichia coli, Gardnerella vaginalis, Klebsiella pneumoniae, Mycoplasma hominis, Neisseria gonorrhoeae, Staphylococcus и Streptococcus. Чувствительность и специфичность молекулярного анализа по сравнению с классическими диагностическими методами сопоставляли у 65 пациенток, обследованных всеми тремя общепринятыми классическими методами.

Результаты: Молекулярный метод продемонстрировал совпадение с гистологическим диагнозом в 30 образцах (14 двойных положительных и 16 двойных отрицательных), точность совпадения составила 46,15%. Совпадение молекулярного и гистероскопического диагноза наблюдалось в 38 образцах (37 двойных положительных и 1 двойной отрицательный), точность составила 58,46%. При сравнении молекулярного метода с микробиологическим посевом совпадение было получено в 37 образцах (22 двойных положительных и 15 двойных отрицательных), частота совпадения составила 56,92%. При учете случаев возможной контаминации и/или некультивируемых бактерий точность повышалась до 66,15%. Из этих 65 пациенток только у 27 был согласованный гистологический + гистероскопический диагноз, что выявило 58,64% несовпадающих результатов. Лишь у 13 из 65 пациенток (20%) результаты гистологии + гистероскопии + микробиологического посева совпали. В этих случаях молекулярная микробиология совпала в 10 случаях, показав диагностическую точность 76,92%. Интересно, что молекулярная микробиология подтвердила более половины выделенных патогенов и дополнительно выявила некультивируемые микроорганизмы. Эти результаты были подтверждены микробиомом, оцененным методом секвенирования нового поколения. В образцах эндометрия с согласованными результатами гистологии + гистероскопии + микробиологического посева диагностика методом молекулярной микробиологии демонстрировала чувствительность 75%, специфичность 100%, положительную прогностическую ценность 100%, отрицательную прогностическую ценность 25%, а также 0% ложноположительных и 25% ложноотрицательных результатов.

Выводы: Описанный здесь метод молекулярной микробиологии является быстрым и недорогим диагностическим инструментом, позволяющим выявлять культивируемые и некультивируемые эндометриальные патогены, ассоциированные с хроническим эндометритом. Полученные результаты были сходны с результатами всех трех классических методов диагностики вместе, при степени согласия 76,92%, что открывает возможность улучшить ведение пациенток с бесплодием и риском этой скрытой патологии эндометрия.