Новые методы количественного определения концентрации и активности дипептидилпептидазы 3 (DPP3) в образцах крови человека

Введение: Повсеместно экспрессируемая дипептидилпептидаза 3 (DPP3) участвует в обмене белков, регуляции артериального давления и модуляции боли. Разнообразные функции DPP3 связывают с деградацией биологически активных пептидов, таких как ангиотензин II. Однако из-за ограничений существующих методов определения активной DPP3 в плазме физиологическая функция DPP3 и её роль в катаболизме биологически активных пептидов изучены недостаточно. Мы разработали два метода для специфического выявления и количественного определения белка DPP3 и её активности в плазме, а также подтвердили возможность количественного определения DPP3 в образцах пациентов в критическом состоянии.

Методы: Аналитические характеристики методов оценивали с помощью люминометрического иммуноанализа типа «сэндвич» (LIA) и анализа активности с захватом фермента (ECA). Концентрацию и активность DPP3 в плазме определяли в популяционной когорте здоровых лиц и у пациентов в критическом состоянии с тяжёлым сепсисом и септическим шоком.

Результаты: Методики DPP3-LIA и DPP3-ECA продемонстрировали практически идеальную корреляцию, а также очень сходные и стабильные аналитические характеристики. Активность DPP3 определялась в плазме преимущественно здоровых лиц и составляла в среднем 58,6 ± 20,5 Ед/л. При поступлении в стационар у пациентов с сепсисом активность DPP3 в плазме была достоверно повышена. У пациентов с более тяжёлым состоянием и высоким риском летального исхода активность DPP3 повышалась ещё больше.

Выводы: Мы разработали два высокоспецифичных метода определения DPP3 в плазме. Эти методы позволяют использовать DPP3 в качестве биомаркера тяжести острых клинических состояний и будут ценны для дальнейшего изучения роли DPP3 в деградации биологически активных пептидов, в частности в метаболизме ангиотензина II.