Разработка и валидация простого метода онлайн-твердофазной экстракции в сочетании с масс-спектрометрией высокого разрешения для анализа N-глюкуронидов станозолола в образцах мочи

Станозолол по-прежнему остаётся наиболее часто применяемым нелегально анаболическим андрогенным стероидом (ААС) в профессиональном спорте. Поэтому для антидопингового анализа важны точные и быстрые методы, а также длительные сроки выявления препарата. В этой работе разработан простой, быстрый и высокочувствительный метод онлайн-твердофазной экстракции в сочетании с высокоэффективной жидкостной хроматографией и тандемной масс-спектрометрией высокого разрешения (HPLC-HRMSMS) для анализа N-глюкуронидов станозолола. Полностью валидированная методика требует лишь нескольких ручных операций при подготовке образцов: разведения и добавления внутреннего стандарта. Предел идентификации (LOI) составил 75 пг/мл; достигнуты высокие показатели правильности (87,1–102,1%), прецизионности (3,1–7,8%) и чувствительности. Кроме того, отмечены хорошая линейность (> 0,99), устойчивость метода и отсутствие эффекта переноса. Помимо отличных характеристик при подтверждающем анализе, метод обладает достаточным потенциалом для выявления и характеристики неизвестных метаболитов. Благодаря наличию стандартных образцов с помощью этого метода впервые удалось однозначно подтвердить присутствие 1′N- и 2′N-глюкуронидов станозолола в моче человека.