Пилюля Динкун регулирует функцию яичников у мышей с вызванной химиотерапией преждевременной недостаточностью яичников через сигнальный путь PTEN/PI3K/AKT/FOXO3a

Этнофармакологическое обоснование: Пилюля Динкун (DKP) — препарат традиционной китайской медицины, который, как показано, благоприятно влияет на репродуктивную функцию. Однако механизм её действия при преждевременной недостаточности яичников (ПНЯ) изучен недостаточно.

Цель исследования: Изучить влияние разных доз пилюли Динкун на функцию яичников у мышей с ПНЯ, вызванной циклофосфамидом (CTX), и исследовать молекулярный механизм действия препарата через сигнальный путь PTEN/PI3K/AKT/FOXO3a. Результаты исследования могут помочь оценить потенциал клинического применения пилюли Динкун для лечения ПНЯ.

Материалы и методы: 50 самок мышей линии ICR случайным образом распределили в группы нормального контроля (NC), модельного контроля (MC) и низкой, средней и высокой дозы пилюли Динкун (DKP-L, DKP-M и DKP-H соответственно). Для создания модели ПНЯ мышам вводили CTX. В течение 21 дня мыши групп DKP-L, DKP-M и DKP-H получали суспензию пилюли Динкун в дозах 0,9, 1,8 и 3,6 г/кг соответственно. Мышам групп NC и MC через зонд вводили такой же объём физиологического раствора. В каждой группе оценивали изменения массы тела, эстрального цикла и индекса яичников. Концентрации ФСГ, ЛГ, E2 и АМГ в сыворотке определяли методом ИФА. Изменения гистологического строения яичников и количество фолликулов разных стадий оценивали при окрашивании гематоксилином и эозином (HE). Уровни экспрессии генов PTEN и FOXO3a в ткани яичников измеряли методом qRT-PCR. Экспрессию белков, связанных с сигнальным путём PTEN/PI3K/AKT/FOXO3a, определяли методом Western blot и иммуногистохимии (IHC).

Результаты: У мышей с ПНЯ пилюля Динкун способствовала увеличению массы тела и восстановлению эстрального цикла, повышала индекс яичников и улучшала их гистологическое строение. В группе средней дозы снижалась концентрация ФСГ (P < 0,05), в группах средней и высокой доз — значительно снижалась концентрация ЛГ (P < 0,01), а в группе высокой дозы повышалась концентрация E2 (P < 0,05). Значимых различий концентрации АМГ между группами, получавшими разные дозы препарата, не было. В группах низкой и средней дозы увеличивалось количество растущих фолликулов разных стадий, тогда как в группе высокой дозы оно значительно снижалось. При этом в группе высокой дозы значительно увеличивалось количество жёлтых тел (P < 0,001), а во всех трёх группах уменьшалось количество атретических фолликулов. Данные qRT-PCR, Western blot и IHC показали, что средняя доза пилюли Динкун повышала экспрессию PTEN в ткани яичников мышей с ПНЯ, подавляя уровни белков p-PI3K и p-AKT и тем самым снижая экспрессию ключевого белка p-FOXO3a. При высокой дозе ингибирующее действие могло быть слабее, чем при низкой и средней.

Выводы: Пилюля Динкун изменяла уровни гормонов, стимулировала рост фолликулов и вызывала овуляцию у мышей с ПНЯ, вызванной CTX; эффект был выражен сильнее при низкой и средней дозах. Механизм действия может быть связан с регуляцией сигнального пути PTEN/PI3K/AKT/FOXO3a.