Переход нейробластомы в мезенхимальное состояние может сопровождаться высокой экспрессией GD2 и приобретением способности уклоняться от уничтожения NK-клетками

Введение: Для нейробластомы (NB) характерно наличие адренергической (ADRN) и недифференцированной мезенхимальной (MES) субпопуляций. Ганглиозид GD2 — содержащий сиаловую кислоту гликосфинголипид, широко гиперэкспрессируемый в опухолях нейроэктодермального происхождения и способствующий формированию злокачественного фенотипа. MES-клетки в значительной степени преобладают в опухолях после лечения и при рецидивах; для них характерно снижение экспрессии GD2. Это может приводить к неэффективности иммунотерапии, направленной против GD2. NK-клетки представляют собой ключевую субпопуляцию клеток врождённого иммунитета, способную эффективно уничтожать опухолевые клетки. Однако микроокружение опухоли, включающее опухолевые и опухоль-ассоциированные клетки, может подавлять их эффекторные функции.

Методы: Мы изучили восемь первичных культур нейробластомы, которые по сравнению с коммерческими клеточными линиями более точно отражают характеристики опухолевых клеток. Были исследованы четыре первичные культуры NB-MES и две пары первичных культур MES/ADRN (691 и 717), полученных от одного и того же пациента. В шести первичных культурах нейробластомы человека оценивали фенотип, экспрессию GD2 и ферментов, регулирующих его экспрессию, а также взаимодействие клеток с NK-клетками с помощью проточной цитометрии, ОТ-кПЦР и тестов на цитотоксичность.

Результаты: Были выявлены зрелые (CD105/CD133) и недифференцированные (CD133/CD105) субпопуляции нейробластомы с высокой экспрессией транскриптов мезенхимального фенотипа WWTR1 и SIX4. Кроме того, недифференцированные MES-клетки обладали выраженной устойчивостью к уничтожению NK-клетками. Зрелые NB-MES-клетки, напротив, характеризовались промежуточной устойчивостью к NK-опосредованному уничтожению и некоторыми иммуномодулирующими свойствами в отношении NK-клеток, но не подавляли их цитолитическую активность. Примечательно, что независимо от недифференцированного или зрелого фенотипа NB-MES-клетки экспрессировали GD2; при совместном культивировании с NK-клетками его экспрессия в недифференцированных NB-MES-клетках могла дополнительно повышаться, что приводило к образованию зрелых мезенхимальных GD2-нейробластов. В образцах 691 и 717 выявлялись высокая экспрессия GD2 и устойчивость к уничтожению NK-клетками; эту устойчивость удавалось преодолеть при добавлении динутуксимаба бета — анти-GD2-моноклонального антитела, применяемого в клинической практике. +-+-яркий

Выводы: Нейробластома представляет собой гетерогенную опухоль, что создаёт дополнительное препятствие для иммунотерапии. Однако, в отличие от результатов, полученных на коммерческих клетках нейробластомы, и независимо от мезенхимального или адренергического фенотипа, экспрессия GD2 и чувствительность к антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичности, индуцированной анти-GD2-моноклональным антителом, указывают на возможную эффективность анти-GD2-иммунотерапии.