Achillea fragrantissima (Forssk.) Sch.Bip индуцирует экспрессию ROS/FADD/c-PARP, запускающую апоптоз в клетках рака молочной железы (MCF-7)

Achillea fragrantissima — кустарниковое растение семейства астровых, произрастающее в Аравии и Египте. Оно используется в народной медицине и является источником фенольных кислот, флавоноидов и ряда активных соединений. Целью исследования было изучить противоопухолевое действие A. fragrantissima на клетки рака молочной железы MCF-7 и определить ключевой механизм, участвующий в индукции апоптоза. Противоопухолевые свойства этанольного экстракта A. fragrantissima оценивали в токсикологических и фармакокинетических исследованиях. Цитотоксичность и жизнеспособность клеток определяли методом МТТ. Кроме того, наличие апоптотических клеток подтверждали с помощью окрашивания трипановым синим и микроскопического исследования. Флуоресцентное окрашивание, включая AO/EtBr, DCFH-DA, Rho-123 и Hoechst-33342, выявило изменения в цитоплазме клеток под действием A. fragrantissima. Также оценивали функциональные характеристики клеток с помощью тестов на заживление раневого дефекта, образование колоний и инвазию в системе Transwell. С помощью количественной ОТ-ПЦР оценивали экспрессию генов апоптотического сигнального каскада, включая Caspase-3, Caspase-8, Caspase-9, Cytochrome c, BCL-2, BID, BAX, PARP, PTEN, PI3K и Akt, индуцированную A. fragrantissima. Иммуноблоттинг подтвердил повышение уровня апоптотических белков, включая расщеплённый PARP, CYCS и FADD. Исследование показало, что A. fragrantissima оказывает цитотоксическое действие на клетки MCF-7 в концентрации 20 мкг/мл через 24 ч. Экстракт снижает жизнеспособность клеток, увеличивает количество апоптотических клеток и вызывает повреждение клеточной поверхности с образованием клеточного детрита. В результате в клетках MCF-7 накапливаются активные формы кислорода, снижается мембранный потенциал митохондрий и происходит фрагментация ДНК. Кроме того, A. fragrantissima подавляет миграцию клеток, снижает их способность к образованию колоний и угнетает инвазию. Экстракт значительно повышает экспрессию генов caspase-3, caspase-9, cytochrome c, BID, BAX и PTEN и одновременно подавляет сигнальный путь PI3K/Akt. Кроме того, A. fragrantissima индуцирует образование расщеплённого PARP, CYCS и FADD в клетках MCF-7, обеспечивая развитие апоптоза.