Дулоксетин повышает экспрессию PAX6 и подавляет реакции врождённого иммунитета при ЛПС-индуцированном воспалении роговицы у мышей

Введение и цель: PAX6 — ключевой регулятор развития глаза и поддержания гомеостаза эпителия роговицы. При его дефиците могут развиваться хроническое воспаление роговицы, неоваскуляризация и дефицит лимбальных стволовых клеток. В настоящем исследовании изучали потенциальную эффективность дулоксетина — дженерического ингибитора обратного захвата серотонина, способного повышать экспрессию PAX6 in vitro, — in vivo при воспалении роговицы.

Методы: Переносимость дулоксетина оценивали на линии лимбальных стволовых клеток человека и изогенных клетках с CRISPR-нокаутом PAX6. Мышам C57BL/6 дикого типа закапывали в глаза дулоксетин в концентрациях от 1 мкМ до 2 мМ, после чего оценивали токсичность и экспрессию PAX6 в роговице. В модели ЛПС-индуцированного воспаления роговицы у мышей влияние дулоксетина на экспрессию PAX6, помутнение роговицы и воспалительные реакции оценивали с помощью прижизненной визуализации роговицы, иммунного окрашивания и микроматричного анализа всего транскриптома.

Результаты: In vitro токсичность дулоксетина не наблюдалась при концентрациях до 10 мкМ. In vivo глазные капли с дулоксетином хорошо переносились в концентрации до 50 мкМ. Закапывание дулоксетина в концентрации 10 мкМ значимо повышало содержание белка PAX6 в роговице на 30% в течение 2 дней. В модели ЛПС дулоксетин обеспечивал устойчивое повышение содержания PAX6 в роговице на 33% через 7 дней и уменьшал её помутнение уже через 2 дня. Эти эффекты сопровождались значимым ослаблением сигналинга IL-17A, дегрануляции нейтрофилов, активации микроглии, экспрессии маркеров макрофагов и матриксных металлопротеиназ, несмотря на отсутствие значимых изменений общей инфильтрации воспалительными клетками.

Выводы: Кратковременное применение дулоксетина, ранее одобренного препарата, повышает содержание белка PAX6 в роговице мышей и оказывает противовоспалительное действие, ослабляя реакции врождённого иммунитета.