Новый усечённый вариант BCL10 в области линкера обусловливает неполный фенотип иммунодефицита

Введение: BCL10 — один из ключевых компонентов комплекса CBM (CARD-BCL10-MALT1), необходимого для активации NF-κB, опосредованной антигенными рецепторами. Дефицит BCL10 представляет собой исключительно редкий аутосомно-рецессивный комбинированный иммунодефицит; к настоящему времени описаны лишь шесть пациентов. Целью исследования была характеристика клинических, иммунологических и молекулярных особенностей нового гомозиготного варианта BCL10 и изучение механизмов, связанных с его неполным фенотипом.

Методы: Проводили клиническое и иммунологическое фенотипирование, полногеномное секвенирование экзома и секвенирование по Сэнгеру, исследование транскриптов и белка, анализ сигнальных путей, продукции цитокинов и пролиферации T-клеток, а также секвенирование РНК отдельных клеток.

Результаты: У пациента с комбинированным иммунодефицитом и иммунной дисрегуляцией выявлен новый гомозиготный вариант BCL10 c.345_346dup (p.Gly116GlufsTer3), сопровождавшийся относительно лёгкими инфекциями, преобладанием терминально дифференцированных эффекторных лимфоцитов и частичным сохранением регуляторных T-клеток. В мононуклеарных клетках периферической крови этот вариант снижал количество полноразмерных транскриптов BCL10 и уровень белка BCL10, одновременно повышая количество транскриптов N-концевого участка; при сверхэкспрессии в клетках HEK293T было показано, что мутантная конструкция in vitro может продуцировать укороченный белок в небольшом количестве. Передача сигнала по NF-κB зависела от стимула: после воздействия PMA/иономицина в T-клетках индукция p-p65 практически отсутствовала, тогда как после стимуляции TNF-α или LPS сохранялась относительно лучше или усиливалась. Пролиферация T-клеток была частично сохранена при стимуляции анти-CD3/анти-CD28, но практически отсутствовала при стимуляции только анти-CD3. Секвенирование РНК отдельных клеток выявило аномальную экспрессию генов, ассоциированных с регуляторными T-клетками, усиление программ активации, апоптоза и клеточного старения в T- и NK-клетках, усиление воспалительной передачи сигнала в B-клетках и моноцитах, а также обогащение путей AP-1/MAPK, воспалительного NF-κB и ответа на интерферон.

Выводы: Новый усечённый вариант BCL10 в области линкера был связан с неполным комбинированным иммунодефицитом и иммунной дисрегуляцией. Нарушение активации NF-κB, зависящей от комплекса CBM, сочеталось с вторичной активацией воспалительных программ, не зависящих от CBM, и программ, связанных с AP-1/MAPK, что указывает на возможный вклад перестройки воспалительных реакций в формирование неклассического фенотипа.