Клинический случай: выявление псевдогомозиготности гена CYP21A2 вследствие межпоколенческого расширения генной конверсии и необходимость мультимодального генетического тестирования

Мутации гена, вызывающие врождённую гиперплазию коры надпочечников (ВГКН), отличаются высокой аллельной гетерогенностью. Редкие мейотические события, такие как расширение границ делеции, могут скрывать истинный генотип, приводя к псевдогомозиготности и диагностическим ошибкам. В настоящем исследовании охарактеризовано редкое межпоколенческое расширение материнской генной конверсии и продемонстрирована критическая роль мультимодального генетического тестирования в разрешении сложных парадоксов наследования при пренатальном консультировании. Обследована семья с классической сольтеряющей формой ВГКН; родители состояли в троюродном родстве. Первичное исследование предположительно выявило гомозиготность по варианту p.Ile173Asn у третьего ребёнка (V-3 на родословной), у которого при рождении отмечалась выраженная вирилизация; первоначально ему определили мужской пол, однако позднее пол был переопределён как женский. Для оценки вариаций числа копий и разрешения расхождений в генотипах родителей использовали разработанную в лаборатории мультиплексную лигазозависимую амплификацию зондов (MLPA) и секвенирование по Сэнгеру с двумя независимыми наборами уникальных праймеров. Исследование материнских зондов выявило гетерозиготную конверсию экзонов 1–3, при этом локус p.Ile173Asn на её аллеле дикого типа оставался интактным. Однако у ребёнка (V-3) эта конверсия в результате мейоза расширилась до экзонов 1–4. Расширение физически устранило материнскую матрицу для праймера дикого типа, вызвав выпадение аллеля при ПЦР и ложную псевдогомозиготную картину при секвенировании по Сэнгеру, которая биологически соответствовала истинной функциональной гемизиготности. Предполагаемая делеция у отца была исключена: причиной нарушения связывания зонда оказалась его гетерозиготная мутация p.Ile173Asn. С учётом уточнённых генотипов ранняя пренатальная терапия дексаметазоном и последующая биопсия ворсин хориона на 12-й неделе беременности позволили подтвердить нормальный плод женского пола с кариотипом 46,XX и генотипом дикого типа; беременность завершилась рождением здорового доношенного ребёнка. Таким образом, данный локус отличается высокой изменчивостью, поэтому для точного генетического консультирования и успешного ведения беременности высокого риска необходимо сочетать методы, чувствительные к изменениям числа копий, с использованием уникальных праймеров.