Метаболиты ацетата 4-хлоротестостерона в моче крупного рогатого скота как диагностические маркеры его незаконного применения

В моче крупного рогатого скота, получившего однократную инъекцию ацетата 4-хлоротестостерона, выявили семь его метаболитов. Стероиды выделяли после нескольких этапов очистки, проводившихся до и после ферментативного гидролиза. Полученный экстракт разделяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, а каждую фракцию исследовали методом высокоэффективной тонкослойной хроматографии и капиллярной газовой хроматографии с масс-спектрометрией метоксим-триметилсилильных производных. Метаболиты предварительно идентифицировали по масс-спектрам выбранных пиков, отсутствовавших в холостых пробах. Структуры двух метаболитов — 4-хлороандрост-4-ен-3,17-диона и 4-хлороандрост-4-ен-3α,17β-диола — подтвердили химическим синтезом. Синтезированные метаболиты, а также 4-хлоро-17α-тестостерон, третий предположительно идентифицированный метаболит, обнаружили на полученных тонкослойных хроматограммах. Результаты показали, что незаконное применение ацетата 4-хлоротестостерона можно выявить, обнаружив в моче один или несколько его метаболитов.