Быстрое определение короткоцепочечных жирных кислот в содержимом толстой кишки и кале человека и крыс методом водной экстракции с подкислением и газовой хроматографии с прямым вводом

В последнее время короткоцепочечные жирные кислоты привлекают большое внимание благодаря их благоприятному физиологическому действию. В настоящей работе разработан и валидирован быстрый и надёжный газохроматографический метод определения восьми короткоцепочечных жирных кислот в образцах содержимого толстой кишки и кала крыс и человека. Методика предусматривает экстракцию короткоцепочечных жирных кислот водой с последующим прямым вводом экстракта на капиллярную колонку FFAP. Был приготовлен и использован исходный стандартный раствор, содержащий уксусную, пропионовую, н-бутировую, изобутировую, н-валериановую, изовалериановую, н-капроновую и н-гептановую кислоты. Получены высокая линейность (r2 > 0,9990), низкий предел количественного определения (2,38–30,14 мкМ) и высокая степень извлечения большинства кислот. Подкисление каловых образцов оказалось критически важным для количественного определения короткоцепочечных жирных кислот; необходимым считалось доведение pH до 2–3. Стекловолокно, помещённое во вкладыш испарителя инжектора, эффективно предотвращало загрязнение колонки нелетучими веществами, а 12% муравьиная кислота уменьшала фантомный пик, постепенно появлявшийся после нескольких вводов. После валидации методику применили к двум образцам кала крыс, получавших рационы с различным содержанием пищевых волокон, и одному образцу кала человека, получавшего обычный рацион, для проверки точности разработанного метода.