Быстрый скрининг и идентификация ингибиторов α-глюкозидазы в листьях шелковицы белой с использованием магнитных частиц с иммобилизованным ферментом в сочетании с ВЭЖХ/МС и ЯМР

α-Глюкозидаза играет важную роль в переваривании и всасывании углеводов в тонком кишечнике. Ингибирование α-глюкозидазы рассматривается как потенциальный подход к лечению сахарного диабета. Мы разработали метод скрининга ингибиторов α-глюкозидазы в лекарственных растениях с использованием магнитных частиц, покрытых ферментом. С применением 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида и N-гидроксисукцинимида в качестве реакционных реагентов α-глюкозидазу ковалентно иммобилизовали на магнитных частицах. Конъюгацию α-глюкозидазы с магнитными частицами исследовали методом сканирующей электронной микроскопии и с помощью рентгеновского дифрактометра. Предложенный метод применили для выявления потенциальных ингибиторов α-глюкозидазы в экстракте Morus alba — лекарственного растения, используемого в традиционной китайской медицине. Структуры потенциально активных соединений идентифицировали методом жидкостной хроматографии с масс-спектрометрией и ядерного магнитного резонанса. Результаты показали, что два флавоноида — изокверцитрин и астрагалин — способны связываться с α-глюкозидазой; это было подтверждено стандартным анализом ингибирования α-глюкозидазы. Полученные данные свидетельствуют о том, что магнитные частицы с иммобилизованным ферментом могут применяться для поиска активных соединений в лекарственных растениях.