Вакцинные и терапевтические векторы вируса осповакцины SMART с механизмом безопасности, управляемым репрессором тетрациклина

Репликационно-компетентные вирусы, такие как вирус осповакцины (VACV), являются мощным инструментом для разработки онколитических вирусных терапий и вызывают более выраженный иммунный ответ при использовании в качестве вакцинных и иммунотерапевтических векторов. Однако неконтролируемая репликация вируса может приводить к тяжелым осложнениям, особенно у иммунокомпрометированных лиц и у пациентов с другими предрасполагающими состояниями. Вирусы осповакцины, конститутивно экспрессирующие интерферон-γ (IFN-γ), в культуре клеток реплицируются неотличимо от контрольных вирусов; однако in vivo их репликация низкая или не определяется, и они быстро элиминируются даже у иммунодефицитных животных. С целью создать безопасные и высокоэффективные репликационно-компетентные векторы VACV мы разработали систему индуцируемой экспрессии IFN-γ. Наши векторы SMART (safety mechanism assisted by the repressor of tetracycline) сконструированы так, чтобы экспрессировать репрессор тетрациклина под конститутивным промотором VACV, а IFN-γ — под сконструированными тетрациклин-индуцируемыми промоторами. У иммунодефицитных мышей SCID, зараженных VACV без экспрессии IFN-γ, развивалась выраженная потеря массы тела, тогда как у животных, получавших VACV с конститутивной экспрессией IFN-γ под промоторами VACV, признаков инфекции не было. Наиболее важно, что мыши, зараженные VACV, несущим ген IFN-γ под индуцируемым промотором, оставались здоровыми в присутствии доксициклина, но демонстрировали выраженную потерю массы тела в его отсутствие. В этом исследовании мы разработали механизм безопасности для VACV, основанный на условной экспрессии IFN-γ под жестко контролируемым тетрациклин-индуцируемым промотором VACV для применения в вакцинах и онколитической терапии рака.