Цитотоксические свойства экстрактов коры стеблей Acanthopanax sessiliflorus в клетках рака молочной железы человека

Acanthopanax sessiliflorus — небольшой древесный кустарник, которому традиционно приписывают противоопухолевую активность, однако до сих пор она не была изучена научно. Для оценки противоопухолевого действия экстрактов коры стеблей A. sessiliflorus (ASSBE) клетки рака молочной железы человека MDA-MB-231 и MCF-7 обрабатывали одной из его биологически активных фракций — n-гексановой (ASSBE-nHF). Цитотоксичность через 24 ч определяли с помощью МТТ-теста, а антипролиферативное действие оценивали по количеству клеток через 72 ч с использованием гемоцитометра. Влияние ASSBE-nHF на апоптоз анализировали методом окрашивания аннексином V-FITC/PI и Hoechst 33342, по характеру фрагментации ДНК и с помощью иммуноблоттинга маркеров апоптоза. Для оценки усиленного образования активных форм кислорода (АФК) и деполяризации мембраны митохондрий использовали специфические красители DCFH-DA и JC-1 соответственно. Чтобы изучить механизм действия ASSBE-nHF на клетки MCF-7, клетки предварительно обрабатывали антиоксидантом N-ацетилцистеином. Гексановая фракция ASSBE оказывала наиболее выраженное действие на клетки рака молочной железы человека по сравнению с двумя другими фракциями при минимальной концентрации 50 мкг/мл. Результаты окрашивания аннексином V-FITC/PI и Hoechst 33342, анализа фрагментации ДНК и иммуноблоттинга показали, что ASSBE-nHF индуцирует неапоптотическую гибель клеток MCF-7 и MDA-MB-231. В клетках MCF-7 ASSBE-nHF значительно усиливала образование АФК и снижала мембранный потенциал митохондрий (МПМ). В клетках MDA-MB-231 фракция также снижала МПМ, но не влияла на образование АФК. Кроме того, цитотоксическое действие ASSBE-nHF на клетки MCF-7 существенно не уменьшалось в присутствии N-ацетилцистеина. Полученные данные свидетельствуют, что ASSBE-nHF вызывает опосредованную митохондриями неапоптотическую гибель клеток рака молочной железы человека с участием как зависимых, так и независимых от АФК механизмов.