Оптимизированный метод выделения стромально-сосудистой фракции жировой ткани и его применение при липофилинге

Введение: Стромально-сосудистая фракция (СВФ), получаемая из жировой ткани, содержит гетерогенные клеточные популяции и обладает значительным потенциалом для клинического применения. Существуют два основных метода выделения СВФ — ферментативный и механический, каждый из которых имеет недостатки. В настоящем исследовании определены оптимальные условия выделения СВФ высокого качества и оценено её применение при липофилинге.

Методы: Жировую ткань измельчали, а затем с помощью шприца растирали до рыхлой консистенции. Образцы переваривали 0,15% коллагеназой II типа в течение 35 минут при температуре 37 °C. После центрифугирования осадок ресуспендировали в DMEM и пропускали через фильтр с размером пор 100 мкм. Фильтрат исследовали методом проточной цитометрии. Жировой трансплантат обогащали выделенной СВФ и пересаживали подкожно бестимусным мышам. Через 3 недели после трансплантации трансплантаты извлекали и выполняли окрашивание гематоксилином и эозином, иммунноцитохимическое исследование и вестерн-блоттинг.

Результаты: За 90 минут процедуры удавалось получить более 2 × 10/мл клеток СВФ из жировой ткани. Число CD34+ ADSC в осадке СВФ превышало 6 × 10/мл жировой ткани; эти клетки обладали потенциалом дифференцировки в остеобласты, адипоциты и хондроциты. Для выделения СВФ предпочтительнее использовать свежеполученную жировую ткань; выделенную СВФ также следует хранить при температуре 4 °C и использовать как можно скорее. СВФ может способствовать реваскуляризации после липофилинга. В группе совместной трансплантации с СВФ жировая ткань имела сохранную структуру и хорошо различимые капилляры, а экспрессия VEGF была выше. Совместная трансплантация с СВФ подавляла апоптоз адипоцитов.6+5

Выводы: Разработана эффективная процедура выделения СВФ и её применения при липофилинге; также предложены возможные механизмы действия.

Уровень доказательности IV: Этот журнал требует от авторов указывать уровень доказательности для каждой статьи. Полное описание рейтингов доказательной медицины приведено в оглавлении или в онлайн-инструкции для авторов: www.springer.com/00266.