Противовоспалительное и антиапоптотическое действие экстрактов Achillea millefolium L. в отношении Clostridioides difficile риботипа 001 в клетках эпителия кишечника человека

Введение: Инфекция Clostridioides difficile (ИКД) — одна из наиболее распространённых инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи. Резкое увеличение устойчивости изолятов C. difficile к противомикробным препаратам обусловило растущую потребность в поиске новых альтернативных средств лечения ИКД. Экстракты Achillea millefolium L. обладают выраженной биологической активностью и могут рассматриваться в качестве потенциальных терапевтических средств. В настоящей работе изучали ингибирующее действие A. millefolium, его отвара и этанольного экстракта на рост C. difficile риботипа 001, а также на воспаление и апоптоз, индуцированные его токсигенным бесклеточным супернатантом (Tox-S).

Методы: Фитохимический состав экстрактов анализировали методом высокоэффективной жидкостной хроматографии и газовой хроматографии. Противомикробные свойства экстрактов оценивали в отношении C. difficile риботипа 001. Жизнеспособность клеток Caco-2 и Vero и цитотоксичность различных концентраций экстрактов и Tox-S оценивали с помощью МТТ-теста и микроскопии соответственно. Противовоспалительное и антиапоптотическое действие экстрактов изучали в клетках Caco-2, стимулированных Tox-S, методом количественной ПЦР с обратной транскрипцией.

Результаты: Анализ фитохимического состава показал, что основным компонентом обоих экстрактов была хлорогеновая кислота. Оба экстракта обладали значимой противомикробной активностью в отношении C. difficile риботипа 001. Кроме того, оба экстракта в концентрации 50 мкг/мл не оказывали значимого влияния на жизнеспособность клеток по сравнению с необработанными клетками. Предварительная обработка клеток экстрактами в концентрации 50 мкг/мл значительно снижала долю округлившихся клеток Vero, индуцированную Tox-S. Как предварительная, так и одновременная обработка экстрактами стимулированных Tox-S клеток Caco-2 значительно снижала экспрессию генов IL-8, IL-1β, TNF-α, TGF-β, iNOS, Bax, каспазы-9 и каспазы-3 и повышала экспрессию Bcl-2.

Выводы: В настоящем исследовании впервые продемонстрированы противомикробная активность экстрактов A. millefolium и их защитное действие в отношении воспалительной реакции и апоптоза, индуцированных Tox-S клинического штамма C. difficile риботипа 001 in vitro. Необходимы дальнейшие исследования для оценки возможности применения экстрактов A. millefolium в качестве дополнительного средства профилактики и лечения ИКД в клинической практике.