Роль и значение цифровой ПЦР, количественной ПЦР и наборов для ПЦР с SYBR Green при выявлении различных заболеваний

Цифровая ПЦР (dPCR) — новейший метод, ставший доступным для коммерческого использования в различных областях исследований. Как и при количественной ПЦР (qPCR) и капельной цифровой ПЦР (ddPCR), в этом методе ДНК-полимераза Taq амплифицирует целевой фрагмент ДНК в составе сложного образца с помощью стандартной полимеразной цепной реакции (ПЦР). ddPCR может облегчить измерение микроРНК (miRNA), особенно при жидкостной биопсии: доказано, что этот метод более эффективен и чувствителен. Кроме того, ddPCR открывает новые возможности для исследований метилирования дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК), поскольку по сравнению с традиционными методами на основе ПЦР повышает чувствительность и точность. qPCR также признана ценным стандартным методом измерения уровней комплементарной ДНК (кДНК) и геномной ДНК (гДНК), однако без надлежащей валидации и проверки праймеров и образцов результаты могут значительно различаться и быть невоспроизводимыми. Метод количественной ПЦР в реальном времени с SYBR Green подходит для количественного выявления и дифференциации видов; его успешно применяли в различных экспериментах для обнаружения, количественной оценки и различения видов. Количественная ОТ-ПЦР в реальном времени с TaqMan и SYBR Green отличается высокой чувствительностью и быстротой; анализ с SYBR Green проще, тогда как анализ с TaqMan специфичнее, но дороже из-за необходимости использовать зонд. Цель этого обзора — представить и сравнить dPCR, qPCR, наборы для ПЦР с SYBR Green и цифровую ПЦР, а также описать их преимущества при выявлении различных заболеваний.